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ELISA實(shí)驗(yàn)必學(xué):洗板方法
閱讀:2759 發(fā)布時(shí)間:2017-7-25洗板是為了吸取非特異性結(jié)合,也就是沒有和你的包被在板子上的東西反應(yīng),就想你喝完飲料里邊會(huì)殘余,你要洗好幾次才能洗掉里邊的味道。而真正和你板子上包被的東西比如一抗二抗,會(huì)結(jié)合的很緊密,洗不掉,如果不洗,那些殘留的會(huì)影響你的結(jié)果,產(chǎn)生假陽性,優(yōu)化ELISA背景的重點(diǎn)之一在于洗滌,洗滌步驟可降低未結(jié)合抗體所引起的背景信號(hào),從何增加分析的信噪比。
其洗板方法有兩種:
1.自動(dòng):如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
2.手工:吸去或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,這里上海恒遠(yuǎn)要提醒朋友們記得不可觸及板壁;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
用途
1.將酶催化反應(yīng)的放大作用和抗原抗體親和反應(yīng)的高度專一性、特異性相結(jié)合,以酶標(biāo)記的抗原或抗體作為主要試劑進(jìn)行免疫測(cè)試,所以具有很高的靈敏度。
2.實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對(duì)其進(jìn)行定量。
3.其抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。
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