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求告知!是什么原因使ELISA實驗結果不顯色?
閱讀：5525 發布時間：2017-8-17 相信對于一些新手ELISA實驗人員來說，實驗做得不理想是難免的事。這不，就在昨天下午，我公司就收到一客戶的咨詢。這位客戶說道：“初次用間接法做ELISA實驗，做了幾次結果都沒有顯色，原因在哪里呢”
針對問題描述，上海恒遠技術員分析出為何間接ELISA沒有顯色，可能原因有這幾個方面：
1.包被原：包括你的包被液有無問題，有沒有配錯。包被原一般加100微升，37度2小時；
2.封閉：封閉液用的是否適合？你說做了幾次都沒顯色，空白孔也不顯嗎？如果空白也無顏 色，那封閉就沒有問題。一般封閉是200微升每孔，也可以滿孔封閉
3.一抗：檢查你的一抗是否失效。是否是在37度反應
4.二抗：底物，底物緩沖液……這些都要好好檢查！
5.洗滌：用PBST洗滌，包被和封閉時洗板3次；一抗二抗洗滌5次，每次間隔3分鐘。手工和機器洗滌沒什么不同，就是省力一些。洗5次不會有負影響，在一抗和二抗洗滌過程中，恰恰需要多洗幾次，這樣有助于減少非特異性吸附。
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