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 雙向瓊脂擴散試驗（Double immunodiffusion test）
   瓊脂擴散試驗可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散，我司能檢測瓊脂擴散的方法有單向瓊脂擴散與雙向瓊脂擴散試驗，以下就是我司技術部為你詳細介紹雙向瓊脂擴散試驗的具體操作方法，給大家做個參考，比對，希望你下次做實驗能取得有效成績。

抗原和抗體加到瓊脂板上相對應的孔中，兩者各自向四周擴散，如兩者相對應，濃度比例合適，則經一定時間后，在抗原、抗體孔之間出現清晰致密的白色沉淀線。每一抗原與其相對應抗體只能形成一條沉淀線，若同時含有若干對抗原抗體系統，因其擴散速度的不同，可在瓊脂中出現多條沉淀線。且根據沉淀線融合情況，還可鑒定兩種抗原是*相同還是部分相同。所以，可用此法來分析和鑒定標本中多種抗原或抗體成份，并用以測定抗原或抗體的效價。
    【材料】羊抗人全血清，小牛血清，正常人混合血清，精制瓊脂粉，生理鹽水、載玻片，打孔器（直徑3mm）、濕盒、吸管等。

    【方法】
    1、用生理鹽水配制1.0～1.5%瓊脂，隔水煮沸使溶化，用吸管吸取3.5ml趁熱澆于載玻片上，制成瓊脂板。
    2、待瓊脂凝固后，按右圖用打 孔器打孔，并用針頭挑去孔中瓊脂（孔距為5mm）。
    3、在①孔中加正常人混合血清，在②孔中加小牛血清，③孔中加羊抗人全血清，注意不要溢出。
    4、將加好樣品的瓊脂板置于濕盒內，于37℃溫箱內放置24小時后觀察結果。

   【結果】
觀察孔間沉淀線的數目與特征，一般可注意到以下幾種現象：
    1、抗原與抗體孔間形成一條沉淀線，說明只有一種抗原與相對應的抗體特異性結合，如出現數條沉淀線，說明有幾組不同的抗原和相對應抗體相結合。
    2、根據抗原的成份可有以下三種現象：（1）若二孔中的抗原相同，與相應抗體形成的沉淀線融合成弧形；（2）若二孔中抗原不同，當抗血清中分別含有與抗原相應的抗體時，則形成的沉淀線相交叉；（3）若兩孔中抗原部分相同，抗血清中有各相應的抗體，形成的沉淀線相切。
    3、相應抗原抗體所形成的沉淀線，如二者濃度相當，沉淀線在孔中央，二者濃度不當時，則沉淀線偏向濃度低的一側

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