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恒遠生物告訴您elisa常見問題的解決方法
閱讀：1522 發布時間：2013-9-25恒遠生物告訴您elisa常見問題的解決方法
elisa實驗中難免碰見一些大大小小的問題，就是這些常見的問題卻會讓人產生心理矛盾，百思不得其解，其實呢要想知道解決的方法就一定要先把問題的原因給弄明白，知道了問題的原因再去尋找問題的解決方法。您在elisa實驗中遇見了不明白的問題了嗎？您找到問題的原因了嗎？如果還沒有找到問題的原因，就請您仔細閱讀這篇文章吧，通過我們公司的技術工作人員們多年的研究與整合，表明得出了以下的幾個結論有方案。
*個呢就是選擇試劑 選擇質量優良的檢測試劑，一定要嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
第二個就是加樣 可能出現的原因有三個，*個原因可能是血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 第二原因可能是手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長（特別是室內溫度較高時）；這第三個原因就可能是加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。這是幾個原因，那么解決方法是什么呢？您還先別著急，這解決辦法就有五個， 第1、 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。第2、 加樣后及時放入孵箱。 第3、 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。第4、如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 第5、 標本較多時，請分批操作。
這第三個呢就是孵育可能原因的原因了，孵育可能是因為在孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*；當然也可能是因為孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。原因出現了，我們自然有解決的方法啦，解決辦法就是貼封片或加蓋； 還有要按說明步驟嚴格控制操作時間。
還有您不懂得原因問題？別著急，還有呢！第四個就是洗板可能原因， *個是 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 第二個是采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。其三呢 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法就是要保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；還有要合理安排，或多用幾臺洗板機。
第五個顯色的原因可能是顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；還可能 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法呢就是顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用；還有加樣時保持顯色劑不外流；zui后呢要記住 A、B液應避免接觸金屬器械。
終止可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
zui后一個就是讀板 如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
常見的幾個問題已經為您解說完了，您仔細的閱讀之后一定明白了不少問題吧！我們再來做一個總結，其實呢在實際操作中，除了選擇優良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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上海恒遠生物
2013-9-25