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快訊:恒遠技術員分析出培養基制備流程
閱讀：1153 發布時間：2015-6-12在微生物檢驗中，正確制備培養基是基礎步驟之一。實驗室使用各種基礎成分制備培養基時，應按照配方準確配制，并記錄相關信息。日前，上海恒遠生物技術員分析出培養基制備流程，在這里分享給大家：
一、水
實驗用水的電導率在25℃時不應超過25μS/cm(相當于電阻率≥0.4ΜΩcm)，除非另有規定要求。
水的微生物污染不應超過103 CFU/mL。應按GB 4789.2，采用平板計數瓊脂培養基，在36℃±1℃培養48h±2h進行定期檢查微生物污染。
二、稱重和溶解
小心稱量所需量的脫水合成培養基(必要時佩戴口罩或在通風柜中操作，以防吸入含有有毒物質的培養基粉末)，先加入適量的水，充分混合(注意避免培養基結塊)，然后加水至所需的量后適當加熱，并重復或連續攪拌使其快速分散，必要時應*溶解。含瓊脂的培養基在加熱前應浸泡幾分鐘。
三、pH的測定和調整
用pH計測pH，必要時在滅菌前進行調整，除特殊說明外，培養基滅菌后冷卻至25℃時，pH應在標準pH±0.2范圍內。一般使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L(約1mol/L)的鹽酸溶液調整培養基的pH。如需滅菌后進行調整，則使用滅菌或除菌的溶液。
四、分裝
將配好的培養基分裝到適當的容器中，容器的體積應比培養基體積zui少大20%。
五、滅菌
1.一般要求
培養基應采用濕熱滅菌法或過濾除菌法。
某些培養基不能或不需要高壓滅菌，可采用煮沸滅菌，如SC肉湯等特定的培養基中含有對光和熱敏感的物質，煮沸后應迅速冷卻，避光保存；有些試劑則不需滅菌，可直接使用。
2.濕熱滅菌
濕熱滅菌在高壓鍋或培養基制備器中進行，高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min，具體培養基按食品微生物學檢驗標準中的規定進行滅菌。培養基體積不應超過1000 mL，否則滅菌時可能會造成過度加熱。所有的操作應按照標準或使用說明的規定進行。
滅菌效果的控制是關鍵問題。加熱后采用適當的方式冷卻，以防加熱過度。這對于大容量和敏感培養基十分重要，例如含有煌綠的培養基。
3.過濾除菌
過濾除菌可在真空或加壓的條件下進行。使用孔徑為0.2μm的無菌設備和濾膜。消毒過濾設備的。
各個部分或使用預先消毒的設備。一些濾膜上附著有蛋白質或其他物質，為了達到有效過濾，應事先將濾膜用無菌水潤濕。
4.檢查
應對經濕熱滅菌或過濾除菌的培養基進行檢查，尤其要對pH、色澤、滅菌效果和均勻度等指標進行檢查。
六、添加成分的制備
制備含有有毒物質的添加成分(尤其是抗生素)時應小心操作(必要時在通風柜中操作)，避免因粉塵的擴散造成實驗人員過敏或發生其他不良反應；制備溶液時應按產品使用說明操作。
不要使用過期的添加劑；抗生素工作溶液應現用現配；批量配制的抗生素溶液可分裝后冷凍貯存，但解凍后的貯存溶液不能再次冷凍；廠商應提供冷凍對抗生素活性影響的有關資料，也可由使用者自行測定。
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