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新春專題之新品二抗的選擇參考資料包
閱讀:1755 發(fā)布時間:2015-2-2前言:后日便是春季的開始了,在新春的到來之前,上海恒遠公司新品抗體試劑系列中的二抗現貨到倉了!上周末期間,我公司技術員特別整理出相關技術內容,下面我們就倆看看今天的主要內容:新春專題之新品二抗的選擇參考資料包。
什么是抗體?
它是高等動物在抗原物質的刺激下由漿細胞產生的一類能與相應抗原發(fā)生特異性結合的免疫球蛋白。
什么是二抗?
二抗是在其它宿主體內制備的能與一抗或一抗片段結合的抗體,上面通常連有酶或熒光素等標簽。由于二抗所具備的優(yōu)點使得其在免疫學實驗中得以應用廣泛:western blot、ELISA、免疫組織化學、免疫細胞化學、流式細胞術、免疫沉淀。
·二抗的選擇
1. 一抗的物種來源:一抗是在什么物種來源的,相應的二抗也要是抗該物種的抗體。
2. 一抗是屬于哪個類或亞類:二抗需與一抗的類別或亞類相匹配,這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應的二抗就是抗IgG抗體。
3. 選用耦聯有哪種探針的二抗?選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實驗。對于western blot和ELISA,zui常用的二抗是酶標二抗,而細胞或組織標記實驗中通常使用熒光基團標記的二抗,免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶或堿性磷酸酶標記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號,可以使用biotin/avidin檢測系統(tǒng)。
通常情況下,一抗可以在山羊、小鼠、兔子、大鼠及綿羊體內制備,其中屬小鼠及兔子zui為常見,相應的,二抗的種屬也應當與一抗的相一致。而對于制備二抗的宿主,則應選擇另外一種不同的動物,一般選用驢、山羊、兔子、綿羊或其他較大的動物,可以實現二抗的大規(guī)模制備,其中又屬山羊使用zui多。
二抗針對某一特定物種的所有抗體均具有特異性,因而使用標記的二抗可以免去對每一個一抗進行標記,大大節(jié)省了時間和費用;此外,一個一抗分子可以同時結合幾個二抗分子,從而使信號大大增強,提高了實驗靈敏度。
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