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大鼠煙堿型乙酰膽堿受體,大鼠煙堿型乙酰膽堿受體試劑盒

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更新時間:2016-05-10 15:39:24瀏覽次數(shù):652

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產(chǎn)品簡介

大鼠煙堿型乙酰膽堿受體試劑盒 可檢測的標(biāo)本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等,用于本試劑盒生產(chǎn)抗體全部美國進(jìn)口,從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

詳細(xì)介紹

大鼠煙堿型乙酰膽堿受體試劑盒酶免檢測試劑盒 
    :
    產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T 
    96T指可以做94個標(biāo)本,2個標(biāo)準(zhǔn)對照 
    48T指可以做47個標(biāo)本,1個標(biāo)準(zhǔn)對照 
    96T-84個樣本 
    48T-42個樣本 
    標(biāo)本要求 
    1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 
    3.組織處理:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 
    本公司長期供應(yīng)科研ELISA試劑盒;人、大小鼠、豬、狗、羊、兔子、豚鼠ELISA試劑盒;各種標(biāo)本血清/血漿/細(xì)胞上清液/組織...;農(nóng)殘檢測ELISA試劑盒;動物疾病檢測ELISA試劑盒;化學(xué)發(fā)光試劑盒;甲狀腺放免試劑盒;性腺類放免試劑盒;腫瘤檢測放免試劑盒;抗體純化試劑盒;OMEGA試劑盒等等。 
大鼠煙堿型乙酰膽堿受體試劑盒 操作步驟 
    實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲坪盟性噭辉噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,均應(yīng)用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。建議各實(shí)驗(yàn)室在操作前行預(yù)實(shí)驗(yàn)以建立*稀釋倍數(shù)。 
    1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100ul,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。 
    為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 
    2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100ul(在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。 
    3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 
    4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100ul,37℃,60分鐘。 
    5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 
    6. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 
    7. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 
    8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 
    注: 
    1. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔(不同于空白孔),該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。 
    2. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室 溫。使用后立即冷藏保存試劑。 
    3. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入檢測溶液B或底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,避免酶標(biāo)板長時間處于干燥狀態(tài)。 
    4. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。 
    5. 在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。 
    6. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,請精確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10ul),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;檢測液A、B,以及底物溶液在使用前,應(yīng)置于37℃溫育30分鐘;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。 
    7. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。 
    洗板方法 
    手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水 
    紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需 
    要,重復(fù)此過程數(shù)次。 
    自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。 
    特異性 
     本試劑盒可同時檢測重組或天然的人Talin,且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。 
    計算 
     以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析,如curve expert 1.3),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。 
大鼠煙堿型乙酰膽堿受體試劑盒 可檢測的標(biāo)本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等,用于本試劑盒生產(chǎn)抗體全部美國進(jìn)口,從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

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