牛的牛小腸堿性磷酸酶   牛的牛小腸堿性磷酸酶試劑盒 
產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份 
    96T指可以做94個標(biāo)本，2個標(biāo)準(zhǔn)對照 
    48T指可以做47個標(biāo)本，1個標(biāo)準(zhǔn)對照 
    96T-84個樣本 
    48T-42個樣本 
    各種種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊… 
    標(biāo)本的采集及保存 
    1. 組織勻漿: 將動物的組織標(biāo)本先用PBS洗滌,去除多余血液,勻漿化后放在20mlPBS中于-20° C放置過夜,第二天,經(jīng)過二次反復(fù)凍融破膜,將勻漿物5000x g離心5分鐘,取上清即可檢測。 
    2. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
    注：以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過1個月，-80℃不應(yīng)超過2個月；標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測；高血脂的標(biāo)本不需進(jìn)行特殊處理，可直接檢測。 
    操作步驟 
    實驗開始前，請?zhí)崆芭渲坪盟性噭辉噭┗驑悠废♂寱r，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時，均應(yīng)用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。建議各實驗室在操作前行預(yù)實驗以建立*稀釋倍數(shù)。 
    1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100ul，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。 
    為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 
    2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100ul（在使用前一小時內(nèi)配制），37℃,60分鐘。 
    3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350ul/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 
    4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100ul，37℃，60分鐘。 
    5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350ul/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 
    6. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 
    7. 依序每孔加終止溶液50ul，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 
    8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 
    注： 
    1. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔（不同于空白孔），該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。 
    2. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室 溫。使用后立即冷藏保存試劑。 
    3. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入檢測溶液B或底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，避免酶標(biāo)板長時間處于干燥狀態(tài)。 
    4. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。 
    5. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。 
    6. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，請精確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置（如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10ul），以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；檢測液A、B，以及底物溶液在使用前，應(yīng)置于37℃溫育30分鐘；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。 
    7. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。 
    Storage condition: Keep at 2-8 degrees C. 
    Manufacturer:R&D Systems, Inc. 
    Pkg. Size 
    96tests 
    Summary 
    This product is for research use only. Do not administer it to human. 
    manufactured by R&D Sstems, Inc.（USA）. 
    上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是國內(nèi)主要供應(yīng)商之一，公司代理了不同品牌價格檔次“  牛的牛小腸堿性磷酸酶試劑盒 ”，另外供應(yīng)數(shù)萬種抗體 試劑等, 品種多，質(zhì)量好，靈敏度高，價格實惠，可免費提供代測服務(wù)（為您節(jié)省時間），詳情請至電。