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DIY夾心法ELISA常見技術指南

閱讀:128發布時間:2015-5-13

DIY夾心法ELISA試劑盒常見技術指南:
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
2、ELISA試劑盒實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。
3、標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節,將凍干的細胞因子復溶。
4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA試劑盒操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。
5、為了優化靈敏度,建議過夜孵育標準品和標本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、當測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.Galectin 1    半乳糖凝集素1抗體
HLTF    解旋酶樣轉錄因子抗體
HMGCS2    三羥基*基*合成酶2抗體
HLA Class 1 ABC    人類白細胞抗原A抗體
HSD17B2    羥類固醇脫氫酶17β2抗體
HSD17B1    羥類固醇脫氫酶17β-HSD抗體
Hepatocyte(2H5)    人肝細胞單克隆抗體/肝細胞特異性抗原抗體
His tag(2D5)    小鼠抗聚*單克隆抗體
Hepcidin-25    鐵調節蛋白/鐵調素抗體
HSJ1    熱休克蛋白J1抗體
Hes5    發狀分裂相關增強子-5抗體
Phospho-HSP90 alpha (Thr5 + Thr7)    磷酸化熱休克蛋白90α抗體
Phospho-Histone H2A.X (Ser139)    磷酸化組蛋白H2AX抗體
Phospho-Histone H3 (Ser28)    磷酸化組蛋白H3抗體
Phospho-Histone H3 (Thr11)    磷酸化組蛋白H3抗體
Phospho-Histone H3 (Thr3)    磷酸化組蛋白H3抗體
HDAC5    組蛋白去乙酰化酶5抗體
H5N1 Hemagglutinin    A型流感病毒H5N1凝集素
HCMV UL49    人巨細胞病毒UL49蛋白抗體
HNF1 beta    肝細胞核因子1β/HNF-1β抗體
HHLA3    HHLA3蛋白抗體
HHIPL2    HHIP樣蛋白2抗體
H3N2 Matrix Protein 2    A型流感病毒H3N2-M2蛋白抗體
HSH2D    HSH2D抗體
Hirudin    水蛭素抗體


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