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技術(shù)文章

微量測(cè)序技術(shù)

閱讀:168發(fā)布時(shí)間:2015-7-3

ELISA試劑盒蛋白質(zhì)的微量測(cè)序已成為蛋白質(zhì)分析和鑒定的基石,可以提供足夠的信息. 盡管氨基酸組分分析和肽質(zhì)指紋譜(PMF)可鑒定由2-DE分離的蛋白,但zui普通的N-末端Edman降解仍然是進(jìn)行鑒定的主要技術(shù). 目前已實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)微量測(cè)序的自動(dòng)化. 首先使經(jīng)凝膠分離的蛋白質(zhì)直接印跡在PVDF膜或玻璃纖維膜上,染色、切割,然后直接置于測(cè)序儀中,可用于subpicomole水平的蛋白質(zhì)的鑒定。
應(yīng)用自動(dòng)化的Edman降解可產(chǎn)生短的N-末端序列標(biāo)簽,ELISA試劑盒這是將質(zhì)譜的序列標(biāo)簽概念用于Edman降解,業(yè)已成為一種強(qiáng)有力的蛋白質(zhì)鑒定. 當(dāng)對(duì)Edman的硬件進(jìn)行簡(jiǎn)單改進(jìn),以迅速產(chǎn)生N-末端序列標(biāo)簽達(dá)10~20個(gè)/d,序列檢簽將適于在較小的蛋白質(zhì)組中進(jìn)行鑒定.若聯(lián)合其他的蛋白質(zhì)屬性,如氨基酸組分分析、肽質(zhì)質(zhì)量、表現(xiàn)蛋白質(zhì)分子量、等電點(diǎn),可以更加可信地鑒定蛋白質(zhì). 選擇BLAST程序,可與數(shù)據(jù)庫(kù)相配比. ELISA試劑盒目前,采用一種Tagldent的檢索程序,還可以進(jìn)行種間比較鑒定,又提高了其在蛋白質(zhì)組研究中的作用。

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