在ELISA試劑盒檢查試驗中，包被原的性質(zhì)很主要，蛋白濃度，是不是降解，這到你做出的抗體可不可以被其識別，所以保留抗原很主要，做重組蛋白時，要在冰浴下緩慢融化即是這個道理。即是讓很多不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地閑暇，然后排斥ELISA試劑盒后的過程中攪擾物質(zhì)的再吸附。但有時因為試驗的需求，包被原的特殊性也可能選用中性的緩沖溶液來包。
ELISA試劑盒操作技巧：
1.加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板外表輕拭吸干。
2.合理安排檢查量，避免反響板過多形成洗板等待時間長。
3.吸取液體時，要用量程和需求量挨近的槍去吸，減少差錯。
4.要盡量做雙孔試驗，這么才既能確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，ELISA試劑盒又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性。
6.為避免樣品蒸發(fā)，試驗時將反響板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
7.未運(yùn)用完的酶標(biāo)板或許試劑，請于2-8℃保留。辣根過氧化物酶符號抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量裝備運(yùn)用。請勿重復(fù)運(yùn)用已稀釋過的辣根過氧化物酶符號抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒試驗中，加樣后及時放人孵箱，標(biāo)本較多時，要分批操作。避免孵育時間人為延伸，致使非特異性結(jié)合緊附于反響孔周圍，難以清潔*。
9.剩下樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.ELISA試劑盒洗刷時各孔均需加滿液體，避免孔口有游離酶不能洗凈。
ELISA載體的形狀主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板zui為常用，于EILSA的產(chǎn)品稱為ELISA板，上標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板為8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測，有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的，放入座架后，大小與標(biāo)準(zhǔn)ELISA板相同。ELISA板的特點是可以同時進(jìn)行大量標(biāo)本的檢測，并可在特制的比色計上迅速讀出結(jié)果。現(xiàn)在已有多種自動化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測，包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟，對操作的標(biāo)準(zhǔn)化極為有利。聚苯乙烯經(jīng)射線照射后，其吸附性能特別是對免疫球蛋白的吸附性能增加，應(yīng)用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多，但用于間接法測抗體時空白值較大。
良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之間、同一板各孔之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別，各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大，因此，每一批號的ELISA板在使用前須事先檢查其性能。常用的檢查方法為：以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔，洗滌后每孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋度的酶標(biāo)抗人IgG抗體，保溫后洗滌，加底物顯色，終止酶反應(yīng)后，分別測每孔溶液的吸光度。控制反應(yīng)條件，使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。計算全部讀數(shù)的平均值。所有單個讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差，應(yīng)小于10%。
與聚苯乙烯類似的塑料是聚氯乙烯。作為ELISA固相載體，聚氯乙烯的特點為質(zhì)軟板薄，可剪割，價廉，但光潔度不如聚苯乙烯板，孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高。
2,2′-聯(lián)氨-雙（3-... 英文名(EN)： ABTS diammonium salt,≥98% CAS No.： 30931-67-0 規(guī)格(SP)： 1G 類別(Key)： 通用試劑
天青石藍(lán) 英文名(EN)： Celestine blue,80% CAS No.： 1562-90-9 規(guī)格(SP)： 1G 類別(Key)： 通用試劑
酚試劑 英文名(EN)： 3-Methyl-2-benzothialinone (HPLC,≥99.... CAS No.： 38894-11-0 規(guī)格(SP)： 5G 類別(Key)： 通用試劑
4-甲氧基苯乙酮 英文名(EN)： 4-Methoxyacetophenone,99% CAS No.： 100-06-1 規(guī)格(SP)： 10G 類別(Key)： 通用試劑
二苯基甲醇 英文名(EN)： Diphenylcarbinol,99% CAS No.： 91-01-0 規(guī)格(SP)： 25G 類別(Key)： 通用試劑
4-(4-硝基苯偶氮)-1... 英文名(EN)： 4-(4-Nitrophenylazo)-1-naphthol CAS No.： 5290-62-0 規(guī)格(SP)： 10G 類別(Key)： 通用試劑
蒽酮 英文名(EN)： Anthrone (ACS,97%) CAS No.： 90-44-8 規(guī)格(SP)： 10G 類別(Key)： 通用試劑
四丁基硫酸氫銨 英文名(EN)： Tetrabutylammonium hydrogensulfate,97% CAS No.： 32503-27-8 規(guī)格(SP)： 25G 類別(Key)： 通用試劑
十五醇 英文名(EN)： 1-Pentadecanol,99% CAS No.： 629-76-5 規(guī)格(SP)： 1G 類別(Key)： 通用試劑
法尼醇 英文名(EN)： Farnesol,95% CAS No.： 4602-84-0 規(guī)格(SP)： 5ML 類別(Key)： 通用試劑 ELISA試劑盒
