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技術(shù)文章

ELISA法測定豬瘟單克隆抗體的操作結(jié)果判定

閱讀:262發(fā)布時間:2017-3-15

進口ELISA試劑盒價格豬瘟單克隆抗體的操作方法

1.用包被液將豬瘟弱毒單抗純化酶聯(lián)抗原、豬瘟強毒單抗純化酶聯(lián)抗原各做100倍稀釋,每孔包被100µl,4℃濕盒過夜。 
2.次日取出,甩去孔內(nèi)液體,3×3′沖洗。 
3.將待檢血清以PBS液做400倍稀釋,每孔加100µl同時將豬瘟陽性血清、豬瘟陰性血清各做100倍稀釋,于對照孔中加100μl。37℃溫育1.5h~2h。 
4.重復第二步,取出,甩去孔內(nèi)液體,3×3′洗滌。 
5.將兔抗豬IgG酶標抗體以PBS液做100倍稀釋,每孔加100μl,37℃溫育1.5h~2h。 
6.重復第4步。 
7.每孔加底物溶液100µl,室溫下觀察顯色反應。當陰性對照孔稍顯色時,立即終止反應,并以陰性孔做空白對照。 
8.每孔加終止液50µl立即于酶聯(lián)免疫吸附檢測儀測定490nm波長的光密度。
進口ELISA試劑盒價格豬瘟單克隆抗體結(jié)果判定
在豬瘟弱毒酶聯(lián)板上,OD≥0.2,為豬瘟弱毒抗體陽性;OD<0.2,為豬瘟弱毒抗體陰性。 
在豬瘟強毒酶聯(lián)板上,OD≥0.5,為豬瘟強毒抗體陽性;OD<0.2,為豬瘟強毒抗體陰性。 
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