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上海撫生實業有限公司
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閱讀:224發布時間:2017-10-13
進口ELISA試劑盒價格操作方法
1、抗原包被 以抗原稀釋液將副結核親和層析抗原稀釋至50µg/ml,每孔包被0.1ml.部分對照孔以牛血清白蛋白(50µg/ml)包被。
2、血清處理 取待檢血清、參考陽性血清、參考陰性血清各0.10ml,加生理鹽水0.80ml,加草分枝桿菌吸收抗原0.10ml,混勻,37℃感作1h.取0.10ml,加血清稀釋液0.90ml(注意血清稀釋液中加牛血清白蛋白,不加犢牛血清)。混勻即可
3、正式試驗 按表12-4進行。每個樣品加2孔,以求OD平均值。
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,可以 采用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合。標本中抗原量量愈多,結合在固相上的酶標抗原愈少,zui后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。做了十多次的ELISA,能夠得到線性比較好的標準曲線,但是同樣濃度的標準品每次的OD值都不一致,樣品就更加慘不忍睹了,除了酶標板之外,其余封閉蛋白,抗體,抗體稀釋度,等等條件都已經更換過,但是問題還是沒能解決,懷疑是酶標板的問題。求教各位高手,有什么方法可以快速驗證酶標板的可靠性。
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