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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗條件的選擇

閱讀:101發(fā)布時間:2018-5-2

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗條件的選擇
1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA試劑盒法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:ELISA試劑盒對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒胃泌素(Gastrin)ELISA試劑盒 ,英文名: Gastrin ELISA Kit

胃泌素(GAS)ELISA試劑盒 ,英文名: GAS ELISA Kit

胃動素(MTL)ELISA試劑盒 ,英文名: MTL ELISA Kit

胃動蛋白2(GKN2)ELISA試劑盒 ,英文名: GKN2 ELISA Kit

*原C(PG-C)ELISA試劑盒 ,英文名: PG-C ELISA Kit

*原A(PG-A)ELISA試劑盒 ,英文名: PG-A ELISA Kit

*(PP)ELISA試劑盒 ,英文名: PP ELISA Kit

*(PG)ELISA試劑盒 ,英文名: PG ELISA Kit

*(GT)ELISA試劑盒 ,英文名: GT ELISA Kit

未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA試劑盒 ,英文名: CpG-ODN ELISA Kit

尾肢同源蛋白2(PYGO2/PP7910)ELISA試劑盒 ,英文名: PYGO2/PP7910 ELISA Kit

尾加壓素2(UST2)ELISA試劑盒 ,英文名: UST2 ELISA Kit

*依賴蛋白Z(PROZ)ELISA試劑盒 ,英文名: PROZ ELISA Kit

*1(VK1)ELISA試劑盒 ,英文名: VK1 ELISA Kit

維生素H(VH)ELISA試劑盒 ,英文名: VH ELISA Kit

*(VE)ELISA試劑盒 ,英文名: VE ELISA Kit

*受體(VD R)ELISA試劑盒 ,英文名: VD R ELISA Kit

*結合蛋白(DBP)ELISA試劑盒 ,英文名: DBP ELISA Kit

*3(VD3)ELISA試劑盒 ,英文名: VD3 ELISA Kit

*2(VD2)ELISA試劑盒 ,英文名: VD2 ELISA Kit

*(VD)ELISA試劑盒 ,英文名: VD ELISA Kit

*(VC)ELISA試劑盒 ,英文名: VC ELISA Kitelisa酶聯(lián)免疫試劑盒

 


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