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進(jìn)口ELISA試劑盒價格開始*啦

閱讀:120發(fā)布時間:2018-8-3

進(jìn)口ELISA試劑盒價格開始*啦
基本信
人類TRACP 是位于第19號染色體P13.2~13.3 處的一個基因編碼的單一同工酶, 該酶是一種結(jié)構(gòu)高度保守的含鐵糖蛋白, 分子量約30~40kD , 只有紅細(xì)胞TRACP 的分子量為17kD。不同人種來源的30~40kDTRACP 氨基酸序列的同源性為85%~95% , 其差異性起源于轉(zhuǎn)錄初期的可選擇性剪接和使用不同的翻譯起始部位,或翻譯后蛋白質(zhì)的修飾, 而不是產(chǎn)生于多基因家族。從人體胎盤和脾臟來源的TRACPcDNA 已克隆分離, 且由此推論出的氨基酸序列是相同的(除少量殘基外) 。
操作方法
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
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