96T人組胺,HISELISA試劑盒說明書
使用說明書
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測，7個工作日出結果，提供原始數據！
檢測范圍：每種的檢測范圍都有所不同,具體請查看說明書
特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的指標，且與其他相關蛋白無交叉反應。
有效期：6個月
預期應用：ELISA法檢測指標血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中含量或靈敏度。
96T人組胺,HISELISA試劑盒說明書實驗原理
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、*化的抗指標抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
2．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3．中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。
4．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。
需要而未提供的試劑和器材
1. 標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等1. 酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標準品（Standard）：2瓶。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. *標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. *標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
96T人組胺,HISELISA試劑盒說明書
操作步驟
實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加*標記抗體工作液 100μl（取1μl*標記抗體加99μl*標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔，甩干。 產品名中文（英文）酶聯免疫吸附測定試劑盒
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同*標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
Human Leukotriene B4,LT-B4 人白三烯B4（LTB4）
Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP 人腸脂肪酸結合蛋白（iFABP）
Rat nitric oxide,NO 大鼠一氧化氮（NO）
Human oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL 人氧化低密度脂蛋白（OxLDL）
Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 人骨髓抑制因子1（MPIF-1/CCL23）
Human adiponectin,ADP 人脂聯素（ADP）
human Histamine,HIS 人組胺（HIS）
human Resistin 人抵抗素（Resistin）
Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B 人骨特異性堿性磷酸酶B（ALP-B）
Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP 人骨鈣素/骨*蛋白（OT/BGP）
Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL 人可溶性核因子κB受體活化因子配基（sRANKL）
Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,DVD/DHVD 3 人1,25二羥基*3（1,25-（OH）2D3/DVD/DHVD 3）
Human histon-H2b 人組蛋白H2b（histon-H2b）
Human Osteoprotegerin,OPG 人骨保護素（OPG）
Human Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ 人骨成型蛋白受體Ⅱ（BMPR-Ⅱ）
Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A 人骨成型蛋白受體1A（BMPR-1A）
Human Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Ki 人骨成型蛋白4（BMP-4）
Human Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 人骨成型蛋白2（BMP-2）
Human cyclic adenosine monophosphate,cAMP 人*（cAMP）
Human mannan binding lectin associated serine protease,MASP 人甘露聚糖結合凝集素相關*蛋白酶（MASP）
Human Cyclin-dependent kinase 7,CDK-7 人周期素依賴性激酶7（CDK-7）
