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撫生試劑-IL-18的檢測

閱讀：168發布時間：2014-5-14

IL-18的檢測
 

(1)C3H／H2J小鼠脾細胞增殖法：用ConA(5ug／mL)和系列稀釋的IL-18樣品共同刺激誘導IFN-y產生。再用ELISA法或病毒抑制試驗檢測細胞培養上清液中的IFN-7含量或活性，以此推測IL-18的活性。

 

    (2)人PBMC增殖法：取3×106／mLPBMC培養在含10％FCS的RPMI-1640培養液中，加入不同濃度的誘導劑(抗CD3抗體0．1ug／mL或10U／mL IL-2或ConA0．5ug/ml)和系列稀釋的人IL-18待檢樣品。置37℃5％C02溫箱中培養24h，用ELISA法或病毒抑制試驗檢測細胞培養上清液中的IFN-7含量或活性，以此推測IL-18的活性。1個單位的IL-18活性為IL-18與0．5ug／mLConA共刺激時，能誘導0．25mLPBMC(7．5X105細胞)產生1601U／mLIFN-y所需的IL-18量。

 

    (3)51Cr釋放試驗：此法可檢測IL-18誘導NK細胞殺傷K562細胞的能力，將人PBMC與系列稀釋的IL-18樣品共孵育24h，然后測定PBMC中的NK細胞活性。


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