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閱讀:468發(fā)布時(shí)間:2014-6-4
親和素與*系統(tǒng)親和免疫組織化學(xué)技術(shù)
親和細(xì)胞化學(xué)不同于免疫細(xì)胞化學(xué),親和細(xì)胞化學(xué)是利用兩種物質(zhì)之間的高度親和能力而相互結(jié)合的化學(xué)反應(yīng);免疫細(xì)胞化學(xué)則是抗原—抗體的反應(yīng),但是從廣義上來(lái)看抗原抗體間也是一種物質(zhì)間的相互親和,本質(zhì)上也屬于親和組織化學(xué)范疇,只是近代免疫組織化學(xué)方法的更新更突出了“親和”這個(gè)組織化學(xué)技術(shù)特點(diǎn)。目前,親和組織化學(xué)中的親和物質(zhì)包括親和素與*、植物凝集素與糖類、葡萄球菌A蛋白(SPA)與IgG、抗原與抗體、陽(yáng)離子與陰離子、激素維生素和脂質(zhì)與受體等。這些方法的建立,使免疫組化技術(shù)的敏感性得到進(jìn)一步提高,更有利于微量抗原(或抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位,擴(kuò)大了其應(yīng)用范圍,從而促進(jìn)了免疫組化技術(shù)的發(fā)展。
一、*
*(biotin)也稱維生素H,是一種分子質(zhì)量為244Da的小分子維生素,等電點(diǎn)(p/)為3.5,呈環(huán)狀結(jié)構(gòu),分子式為CioHl6CeN2S。它廣泛存在于植物和動(dòng)物組織中,尤以肝、腎、蛋黃、脂肪和乳腺等組織含量豐富。*和親和素之間有*的親和力,比抗體對(duì)抗原的親和力要高出100萬(wàn)倍,兩者之間呈非共價(jià)鍵結(jié)合,作用非常快,一旦結(jié)合很難解離,并且不影響彼此的生物學(xué)活性。抗體分子經(jīng)*化后,其結(jié)合抗原的能力不受損失,細(xì)胞經(jīng)*化后仍能保持正常的分裂、增殖能力,因此它也可以用作細(xì)胞的標(biāo)記。
二、親和素
親和素(avidin)是一種分子質(zhì)量為68000Da,pJ為10.5的一種堿性糖蛋白,在雞蛋清中含量比較豐富,占總蛋白的o.05%,因此一般從蛋白清中提取,故又稱卵白素。親和素有4個(gè)亞單位,它具有4個(gè)同*親和力*的結(jié)合位點(diǎn),因其能使*失活,故又稱抗*。親和素除和小分子*具有*的親和力外,還具有與其他示蹤物質(zhì)(如熒光素、酶、膠體金等)相結(jié)合的能力。免疫細(xì)胞化學(xué)工作者利用上述特性,建立了親和素—*免疫染色系統(tǒng)。由于維生素H習(xí)慣上稱為*,為便于理解,現(xiàn)在譯名上統(tǒng)稱親和素為抗生素或親和素。親和素—*免疫染色系統(tǒng)又稱為抗生素—*或親和素—*免疫染色法。
三、鏈霉親和素
鏈霉親和素(streptavidin)是一種從鏈霉菌培養(yǎng)物中提取的蛋白質(zhì),相對(duì)分子質(zhì)量60000,且不含糖鏈。同親和素一樣,也具有4個(gè)*結(jié)合位點(diǎn),親和力高達(dá)lO-iSmol/L,是一種更的*結(jié)合蛋白。因?yàn)樗苌儆械途厶菤堄喑煞郑杀3种行缘入婞c(diǎn),避免了組織中的非特異性染色。
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