俄羅斯科學家獲得高發(fā)光突變蛋白
為了觀察細胞內(nèi)部的現(xiàn)象，科學家常需使用熒光蛋白。俄羅斯*西伯利亞分院生物物理研究所的研究團隊在研究細胞內(nèi)部活動變化的過程中，通過對海洋橈足類水蚤熒光蛋白基因編碼的重組、蛋白質(zhì)改性以及對分子發(fā)光強度的研究，獲得了發(fā)光強度超過自然水蚤蛋白5倍的突變發(fā)光蛋白。
在某些情況下，使用熒光蛋白長時間監(jiān)測細胞內(nèi)部的變化過程非常困難，特別是如果使用螢火蟲科的熒光蛋白，熒光反應只能發(fā)生在特定的條件下，需要氧氣、三磷酸腺苷和鎂離子的共同作用，而保持這些成分在細胞內(nèi)的有效含量比較困難，使得熒光分析不能維持較長時間。而橈足類細長長腹水蚤的熒光蛋白的熒光反應則簡單的多，僅需鈣離子和氧氣的共同作用。
俄羅斯的研究人員通過對細長長腹水蚤的發(fā)光蛋白基因進行克隆，借助于基因操作，替換蛋白質(zhì)中的正常氨基酸，獲得突變蛋白質(zhì)，再將這種蛋白質(zhì)的核苷酸編碼插入質(zhì)粒的環(huán)狀DNA中并使其在宿主細胞（大腸桿菌）中復制，通過宿主細胞得到熒光蛋白。
研究人員在研究過程中發(fā)現(xiàn)，水蚤熒光蛋白的發(fā)光現(xiàn)象位于熒光蛋白質(zhì)N端部分，并不影響氨基酸的活性。如果切斷N端部分（蛋白質(zhì)分子一端的氨基酸），就會增強熒光反應的強度并使其發(fā)光強度達到以前的5倍，此外，該水蚤熒光蛋白的遠端氨基酸非常接近于哺乳動物，適用于哺乳動物細胞反應變化過程的熒光分析，比天然的熒光蛋白具有更強的靈敏度。
俄羅斯科學家獲得高發(fā)光突變蛋白
