人CD52 ELISA檢測試劑盒實驗總結方法
D52試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知CD52濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。人CD52 ELISA檢測試劑盒先將CD52和*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中CD52的濃度呈比例關系。
1，包是非常重要的，蛋白質濃度，原來的性質是否降解，抗體，使你可以識別，從而節省抗原是非常重要的，我做的重組蛋白，他嚴厲警告我必須在冰浴是緩慢的融化是真理。有一些涂層可不是蛋白質，*和脂類或小分子，我們的裝修之前涂，我簡要如下： 2460親和素-*抗*蛋白涂層：*載體，加入*標記的，這種鍍膜的方法均勻，牢固，已擴大應用于各種抗原定量測定。ELISA試劑盒脂質：可以在有機溶劑（如酒精）孔加入溶解后，打開冰箱隔夜或冷干，待酒精揮發，在固體表面上進行自然干燥的固體脂質。小分子必須依靠和大的載體蛋白偶聯可以固定在固體載體上。
2，包衣液的選擇，碳酸鹽緩沖液通常選擇9。6。但有時因為測試需求，數據包緩沖溶液是一種特殊的原料可采用中性包裝。應注意以下原則：蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合，取決于在固相的疏水性基團和疏水性相互作用的載體表面蛋白分子的結構，物理吸附是非特異性的，蛋白分子量，等電點，大集中，小分子蛋白蛋白質通常含有疏水基團越多，所以更容易吸附在固相載體表面。測試也有很強的理論于實踐，看zui后一個可以應用到我們的測試。除了剛才提到的9。6碳酸鹽緩沖液常用的涂料溶液，和磷酸鹽緩沖液和7-8 7。2 -緩沖。
3，關閉：以下包之后是無關的蛋白質溶液濃度高，涂層工藝。隨函附上使大量不相關的蛋白質充填這些空隙，和干擾物質的免疫排斥和吸附步驟。ELISA試劑盒常用的密封：0。05% - 0。5%牛血清白蛋白；10%或1%明膠牛血清；脫脂奶粉，價格相對低廉，可用于高濃度（5%～10%）；和一些罕見的使用各種動物血清（主要是為了消除類似的蛋白和酪蛋白等干擾）。但到底選擇什么，根據實驗的具體實踐。
4，洗板：可以說，在中操作，清洗是在主要的關鍵技術。由于聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍存在的，為了實現自由酶與客觀相結合的標記的分離，在板料孔中殘留游離和吸附的非特異性干擾物質的去除，洗滌，并應將干擾物質洗滌下來的非特異性吸附。所以在洗衣板會有一定的誤差，非常人的因素（當然也有洗衣機除條件），是不完整的或弦清孔，系統的影響是如此敏感，但不小。
5，加抗體（抗標本和兩個）：注意的槍頭，槍頭。樣品用稀釋稀釋，也可以用稀釋的閉解。如果要添加兩個電阻，但也要注意兩個反工作濃度的廢物，太高，太低的光的顏色。
