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上海撫生實業有限公司
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閱讀:137發布時間:2014-07-16
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小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯后才能固定在固相載體上。還有有的包被原可能不是蛋白,對于*和脂類物質或小分子物質我們要事先對其改造再加以包被,ELISA試劑盒親和素*:先親和素先包被載體,加入*化的DNA,這種包被方法平均、牢固,已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液,還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
應用到科研出產中zui為敏捷的技術手段。自己也為此苦惱過很長一段時間,跟著自己技術水平得進步,或多或少地也把握了ELISA試劑盒體系的脾氣,也是熟能生巧吧,現在做方陣,做ELISA試劑盒已是輕車熟路了,以前檢測一種抗體用整整一下戰書還算得暈暈的,現在給我十個八個的從包被到顯色,一個工作日基本搞定。
ELISA試劑盒可是在新老手操縱過程中老是會泛起或大或小的題目,本人在剛開始做ELISA試劑盒時就面對良多災題,固然有師兄師姐鋪路,但仍是經常做得烏煙瘴氣,好比說花板,假陽性,全顯色,全部顯色,顯色比空缺還低。包被原的性質很重要,蛋白濃度,是否降解,這關系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保留抗原很重要,我做重組蛋白時,ELISA試劑盒師兄都嚴格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。
封鎖就是讓大量不相關的蛋白質充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA試劑盒后的步驟中干擾物質的再吸附。但有時因為試驗的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。ELISA試劑盒這種物理吸附長短特異性的,受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響,大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團,故更易吸附到固相載體表面。
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