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上海撫生實業有限公司
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閱讀:85發布時間:2016-11-07
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ELISA實驗中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結合物和酶的底物。完整的兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒應該包含以下各組分:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);
(5)結合物及標本的稀釋液;
(6)洗滌液;
(7)酶反應終止液。
免疫吸附劑
已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下一般可保存6個月。有些不完整的試劑盒,僅供應包被用抗原或抗體,檢測人員需自行包被。以下簡述固相載體和包被過程。
兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒實驗步驟
一、預試驗
(一)抗體包被的酶標板的制備
1.以碳酸鹽緩沖液將抗體稀釋成適當濃度(參考:5ug/ml),加入酶標板(50ul/孔),以膠帶封口,于4℃過液。
2.棄抗體液,以雙蒸水沖洗3次,自然干燥后以膠帶封口。此為由已知抗體包被的酶標板,備用。
(二)底物濃度的摸索
在底物緩沖液中加入不同量的底物(參考:5mg/10ml),加入酶標板中(50ul/孔),以膠帶封口,37℃避光保存2h,在沒有明顯變色的條件下選擇盡可能大的底物濃度。
(三)酶標抗原濃度的摸索
選擇明確為陰性的標本,加至已包被抗體的酶標板中(50ul/ 孔);用稀釋液稀釋酶標抗原至適當倍數(參考:40~4000倍),同時加入酶標板中(50ul/ 孔),混合后封口后于37℃作用30min。以洗液連續沖洗5次,然后于吸水紙上拍干,加入已摸索好的底物封口后于37℃作用30min,在保持有明顯變色的條件下選擇盡可能小的酶標抗原濃度。
兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒正式試驗
1. 以稀釋液將待檢標本做適當稀釋(預試中確定)加入包被有已知抗原的酶標板中(50ul/孔),加封口膠帶于37℃作用30min。
2. 棄反應液,以沖洗液連續洗板5次并于吸水紙上拍干。
3. 加入酶標抗體(濃度在預試中確定)。加封口膠帶后于37℃作用30min。
4. 重復第2步。
5. 加底物(濃度在預試中確定),加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60 min,其間不時觀察,顯色滿意后加終止液50ul/孔。
6. 于酶標儀測定OD值,OPD用492nm測定,TMB用450nm測定。
乙醇胺激酶α抗體 0.1ml 英文名稱: Choline kinase alpha 乙醇胺激酶α抗體
胞漿動力蛋白中間鏈1抗體 0.1ml 英文名稱: DYNC1I1 胞漿動力蛋白中間鏈1抗體
胞漿動力蛋白中間鏈2抗體 0.2ml 英文名稱: DYNC1I2 胞漿動力蛋白中間鏈2抗體
抑癌蛋白DKK3抗體 0.1ml 英文名稱: DKK3 抑癌蛋白DKK3抗體
腫瘤壞死因子配體超家族成員10C 0.1ml 英文名稱: DcR1 腫瘤壞死因子配體超家族成員10C
干擾素誘導蛋白p58ipk抗體 0.1ml 英文名稱: DNAJC3 干擾素誘導蛋白p58ipk抗體
轉錄調節因子DACH2抗體 0.2ml 英文名稱: DACH2 轉錄調節因子DACH2抗體兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒
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主營產品:ELISA試劑盒,水檢測試劑儀器,放免試劑盒,美國藥典標準品,中檢所標準品,sigma原裝試劑,實驗室耗材設備,胎牛血清
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