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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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ELISA試劑盒價(jià)格測(cè)定方法有以下幾點(diǎn)
2.1 比色法
比色法是以反應(yīng)生成有色化合物的顯色反應(yīng)為基礎(chǔ),通過(guò)比較或測(cè)量有色物質(zhì)溶液顏色深度來(lái)確定待測(cè)組分含量的方法,根據(jù)原理不同可分為還原糖法和色原底物法。
2.1.1 還原糖法 這種方法是通過(guò)酶作用于化學(xué)合成或從自然界提取出來(lái)的底物來(lái)進(jìn)行測(cè)定的。非淀粉多糖酶與底物在特定的條件(溫度、pH值和底物濃度)下反應(yīng),反應(yīng)產(chǎn)物為還原糖,在與顯色劑反應(yīng)后,通過(guò)比色確定還原糖的生成量,同時(shí)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。酶的活性表示為單位時(shí)間產(chǎn)生一定濃度的產(chǎn)物所需要的酶量(mg 或mL)。該法可適用于大部分酶活力的測(cè)定,如*、蛋白酶、脂肪酶、植酸酶、木聚糖酶、果膠酶、β-葡聚糖酶、纖維素酶等的測(cè)定。根據(jù)顯色劑的不同又可分為DNS 法、釩鉬酸銨法和地衣酚法。其中DNS 法由于操作簡(jiǎn)單、顯色穩(wěn)定,是目前眾多實(shí)驗(yàn)室和飼料企業(yè)在測(cè)定非淀粉多糖酶時(shí)應(yīng)用zui多的測(cè)定方法。
2.1.2 色原底物法 原理是利用人工合成的含色原基團(tuán)的底物在酶的作用下釋放出有色物質(zhì),利用分光光度計(jì)比色測(cè)定有色物質(zhì)的含量計(jì)算酶活。如木聚糖酶活力的測(cè)定。該法操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好,但酶作用于合成底物與天然底物的效果有一定區(qū)別,用合成底物測(cè)定的酶活并不能代表酶制劑在應(yīng)用于天然飼料時(shí)所能發(fā)揮的酶活大小。
2.2 黏度法
這種方法是根據(jù)酶能夠降低一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)底物(控制pH值、溫度等條件)的黏度的能力來(lái)確定酶的活性。利用的底物主要有化學(xué)合成的底物(如CMC 用于纖維素酶的測(cè)定) 和自然提取的底物(如小麥阿拉伯木聚糖用于木聚糖酶的測(cè)定)。測(cè)定的酶的活性值是通過(guò)與同時(shí)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)酶活性的比較,來(lái)確定酶的活性。該法可用于木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活測(cè)定。這種方法的特點(diǎn)是通過(guò)降低底物的粘度來(lái)反映酶的活性,這也正是酶在體內(nèi)起作用的重要特征。該法雖然靈敏度較高,但重現(xiàn)性差,操作復(fù)雜費(fèi)時(shí),應(yīng)用難于普及。
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