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淺談使用ELISA試劑盒過程的注意事項

閱讀:96發(fā)布時間:2016-10-11

進口ELISA試劑盒被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:①標本因素;②試劑因素;③操作因素。下面就一些常見ELISA操作過程中的問題一一分析。 
1.樣品稀釋 
酶聯(lián)免疫反應是一種敏感性很高的反應,如果血清不稀釋,不可避免會產生很強的非特異性反應,出現(xiàn)假陽性。 
2.
進口ELISA試劑盒平衡 
試劑盒中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。
其次,單波長或雙波長比色選擇的問題。所謂的單波長比色即是通常的以對顯色具有吸收的波長如450nm或492nm進行比色測定;而雙波長雙色則酶標儀在敏感波長如450nm和非敏感波長如630nm下各測定一次,敏感波上下的吸光度測定值為樣本測定酶反應特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和;非敏感波長下測定即改變波長至一定值,使得樣本測定酶反應特異顯色的吸光度值為零,此時測得的吸光度即為臟物的吸光度值。 

Caspase-13     半胱胺酸蛋白酶蛋白-13(抗原)
CD19(B-lymphocyte antigen CD19)    CD19
DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)N terminal    雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原(N端)
DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)    雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原
MMP9    基質金屬蛋白酶9
Mycobacterium bovis     牛結核桿菌菌體蛋白
AMH/MIS    Muellerian抑制因子抗原
AEG-1 peptide    AEG-1抗原
CD31 (PECAM-1)    血小板內皮細胞黏附分子-1(抗原)
ADFP/ADRP/adipophilin     脂肪組織分化相關蛋白抗原
Immunoglobuin binding protein-1(CD79A)IGBP-1    免疫球蛋白結合蛋白-1
進口ELISA試劑盒

 

 

 

 


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