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聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 智慧城市網(wǎng)抗CD40L抗體經(jīng)過*實(shí)踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟,在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。
抗CD40L抗體動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得,因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長(zhǎng)雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì),不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn),故而用SPF級(jí)小鼠。 抗CD40L抗體A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時(shí),皮膚有緊張感,即可用16號(hào)針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測(cè)定抗體效價(jià),分裝,-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀4妗?span style="color: #ff0000"> (2) 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng),又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。
公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊: Human urokinase plasminogen activator,uPA 人*型纖溶酶原激活物(uPA)
Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域*激酶2(Tie-2)
Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase,MMP-8 人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)
Human Matrix metalloproteinase 7,MMP-7 人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)
Human Matrix metalloproteinase 3,MMP-3 人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)
Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)
Human Matrix metalloproteinase 13,MMP-13 人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)
Human Matrix metalloproteinase 10,MMP-10 人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)
Human Matrix metalloproteinase 1,MMP-1 人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)
Human FMS-like tyrosine kinase 3,Flt3 人FMS樣*激酶3(Flt3)
Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L 人FMS樣*激酶3配體(Flt-3L)
Human Angiotensin converting enzyme,ACE 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)
Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor,AMBP 人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)
雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段,即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無(wú)疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多,細(xì)胞存活時(shí)間越長(zhǎng),單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。
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