軟骨糖蛋白39抗體動物體內單抗的方法迄今為止，通常情況下均采用動物體內單抗的方法，鑒于絕大多數動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得，因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內，在小鼠腹腔內生長雜交瘤，并產生腹水，因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經濟，不過，腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白（包括Ig），因此在很多情況下要提純后才能使用，而且還有污染動物病毒的危險，故而用SPF級小鼠。軟骨糖蛋白39抗體A、材料：a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷（Pristane）或液體石蠟。c. 處于對數生*的雜交瘤細胞。
B、方法：a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟，每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養基稀釋的雜交瘤細胞，每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后，每天觀察小鼠腹水產生情況，如腹部明顯膨大，以手觸摸時，皮膚有緊張感，即可用16號針頭采集腹水，一般可連續采2-3次，通常每只小鼠可采5-10ml腹水；d. 將腹水離心（2000r/min 5分鐘），除去細胞成分和其他的沉淀物，收集上清，測定抗體效價，分裝，-70℃凍存備用，或凍干保存. （2） 體外培養單抗的方法總體上講，雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞（anchorage dependent cell，ADC），因此既可以進行單層細胞培養，又可以進行懸浮培養。
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Human membrane attack complex,MAC 人膜攻擊復合物（MAC）
Human EuglobulinLysis,EL 人優球蛋白（EL）
Human free haemoglobin,f-Hb 人游離血紅蛋白（f-Hb）
Human Protamine 1,PRM1 人*1（PRM1）
Human carboxyhemoglobin,HbCO 人一氧化碳血紅蛋白（HbCO）
Human plaet-associated immunoglobulins,PAIg 人血小板相關免疫球蛋白（PAIg）
Human plaet-associated Complement 3,PAC3 人血小板相關補體3（PAC3）
Human Thromboxane A2,TX-A2 人血栓素A2（TX-A2）
Human Hemoglobin H,HbH 人血紅蛋白H（HbH）
Human Hemoglobin C,HbC 人血紅蛋白C（HbC）
雜交瘤細胞的單層細胞培養法是各個實驗室zui常用的手段，即將雜交瘤細胞加入培養瓶中，以含10-15%小牛血清的培養基培養，細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳，然后收集培養上清，其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然，這種方法制備的單抗量極為有限，無疑是不適用于單抗的大規模。要想在體外大量制備單抗，就必須進行雜交瘤細胞的大量（高密度）培養。單位體積內細胞數量越多，細胞存活時間越長，單抗的濃度就越高，產量就越大。
