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上海撫生實業有限公司
c-Jun氨基末端激酶1/3抗體經過*實踐已經發展的相當成熟,在免疫學診斷中的應用也相當廣泛。
c-Jun氨基末端激酶1/3抗體動物體內單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內單抗的方法,鑒于絕大多數動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內,在小鼠腹腔內生長雜交瘤,并產生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經濟,不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。 c-Jun氨基末端激酶1/3抗體 A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數生*的雜交瘤細胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,-70℃凍存備用,或凍干保存。
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Human lambda immunoglobulin light chain,λ-IgLC *輕鏈lambda(λ-IgLC)
Human peptide major histocompatibility complex,pMHC 人肽-主要組織相容性復合體復合物(pMHC)
Human cutaneous lymphocyte-associated antigen,CLA 人皮膚淋巴細胞相關抗原(CLA)
Human thrombinthrombomodulin compound,T-TM 人*血栓調節蛋白復合物(T-TM)
Human Hemolytic complement,Hc 人溶血補體(Hc)
Human T cell receptor,TCR 人T細胞受體(TCR)
Human lupus anticoagulant,LAC/LA 人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)
Human soluble fibrin monomer complex,SFMC 人可溶性血纖蛋白單體復合物(SFMC)
Human sreum albumin,HSA 人血清白蛋白(HSA)
Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)
Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)
Human Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI 人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)
Human plaet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)
Human thrombospondin 1,TSP-1 人血小板反應蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)
Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)
Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 人末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)
Human Complement 4,C4 人補體蛋白4(C4)
Human Complement 3,C3 人補體蛋白3(C3)
(2) 體外培養單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養,又可以進行懸浮培養。雜交瘤細胞的單層細胞培養法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養瓶中,以含10-15%小牛血清的培養基培養,細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養。單位體積內細胞數量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產量就越大。
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