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上海撫生實業有限公司
肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體經過*實踐已經發展的相當成熟,在免疫學診斷中的應用也相當廣泛。
肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體動物體內單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內單抗的方法,鑒于絕大多數動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內,在小鼠腹腔內生長雜交瘤,并產生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經濟,不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。 肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體 A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數生*的雜交瘤細胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,-70℃凍存備用,或凍干保存。
公司產品詳情請參閱有關詳細論述鏈接點擊: Human B cell differetiation factor,BCDF 人B細胞分化因子(BCDF)
Human Epithelial Cell Adhesion Molecule,Ep-CAM 人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)
Human soluble adhesion molecules,Sam 人可溶性粘附分子(Sam)
Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 人巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)
Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 人可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)
Human thymic stromal lymphopoietin,TSLP 人胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)
Human Perforin/Pore-forming protein,PF/PFP 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)
Human pleiotrophin,PTN 人多效生長因子(PTN)
human soluble cluster of differentiation 28,sCD28 人可溶性CD28(sCD28)
Human lymphocyte factor 人淋巴細胞因子
Human thymus activation regulated chemokine,TARC 人胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)
Human Neural cell adhesion molecule ligand 1,NCAM-L1 人神經細胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)
Human Cobra venom neuronal protective factor,CVNPF 人神經保護因子(CVNPF)
Human soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor,sTNFαR 人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)
Human soluble cytokine receptor,sCKR 人可溶性細胞因子受體(sCKR)
Human soluble Factor-related Apoptosis ligand,sFASL/Apo-1 人可溶性凋亡相關因子配體(sFASL)
Human inhibitor of apoptosis,IAP 人細胞凋亡抑制因子(IAP)
Human colony-stimulating factor,CSF 人集落刺激因子(CSF)
Human monocyte interferon gamma inducing factor,MIGF 人γ干擾素誘導單核細胞因子(MIGF/CXCL9)
Human Interferon inducible T-cell Chemoattractant,I-TAC 人干擾素誘導T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11) (2) 體外培養單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養,又可以進行懸浮培養。雜交瘤細胞的單層細胞培養法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養瓶中,以含10-15%小牛血清的培養基培養,細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養。單位體積內細胞數量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產量就越大。
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