層粘連蛋白抗體動物體內(nèi)單抗的方法迄今為止，通常情況下均采用動物體內(nèi)單抗的方法，鑒于絕大多數(shù)動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得，因此使用的動物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi)，在小鼠腹腔內(nèi)生長雜交瘤，并產(chǎn)生腹水，因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經(jīng)濟(jì)，不過，腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白（包括Ig），因此在很多情況下要提純后才能使用，而且還有污染動物病毒的危險，故而用SPF級小鼠。 層粘連蛋白抗體 A、材料：a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷（Pristane）或液體石蠟。c. 處于對數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法：a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟，每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞，每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后，每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況，如腹部明顯膨大，以手觸摸時，皮膚有緊張感，即可用16號針頭采集腹水，一般可連續(xù)采2-3次，通常每只小鼠可采5-10ml腹水；d. 將腹水離心（2000r/min 5分鐘），除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物，收集上清，測定抗體效價，分裝，-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀４妗?br /> 公司產(chǎn)品詳情請參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點擊：
Human apoptosis inducing factor,AIF 人凋亡誘導(dǎo)因子（AIF）
Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 人白細(xì)胞共同抗原（LCA/CD45）
Human cluster Of differentiation,CD4 人CD4分子（CD4）
Human Placenta Cadherin,P-cad 人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白（P-cad）
Human Keratinocyte Growth Factor,KGF 人角化細(xì)胞生長因子（KGF）
Human Plaet-Derived Growth Factor-BB,PDGF-BB 人血小板衍生生長因子BB（PDGF-BB）
Human CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 人CXC趨化因子配體16（CXCL16）
Human CXC-chemokine receptor 3,CXCR3 人CXC趨化因子受體3（CXCR3）
Human interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16（IFI16/p16）
Human Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a（SDF-1a/CXCL12）
Human lymphotactin,Lptn/LTN 人淋巴細(xì)胞趨化因子（Lptn/LTN/XCL1）
Human Interferon α,IFN-α 人α干擾素（IFN-α）
Human soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 人可溶性CD86（B7-2/sCD86）
human Interleukin 27,IL-27 人白介素27（IL-27）
Human Interleukin 23,IL-23 人白介素23（IL-23）
Human Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF 人巨噬細(xì)胞移動抑制因子（MIF）
Human Tissue factor pathway inhibitor,TFPI 人組織因子途徑抑制物（TFPI）
Human interferon-inducible protein 10,IP-10 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10（IP-10/CXCL10）
Human Interleukin 1,IL-1 人白介素1（IL-1）
Human Interleukin 17,IL-17 人白介素17（IL-17）
Human Interleukin 1β,IL-1β 人白介素1β （IL-1β）（2） 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講，雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞（anchorage dependent cell，ADC），因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng)，又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個實驗室zui常用的手段，即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中，以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)，細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳，然后收集培養(yǎng)上清，其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然，這種方法制備的單抗量極為有限，無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗，就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量（高密度）培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多，細(xì)胞存活時間越長，單抗的濃度就越高，產(chǎn)量就越大。
