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絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體

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更新時(shí)間:2016-04-04 23:03:35瀏覽次數(shù):368次

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絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體經(jīng)過*實(shí)踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟,在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。

詳細(xì)介紹

絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體 動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得,因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長(zhǎng)雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì),不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn),故而用SPF級(jí)小鼠。 絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體A、材料:a.  成年BALB/c小鼠。b.  降植烷(Pristane)或液體石蠟。c.  處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法:a.  腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b.  7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c.  間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時(shí),皮膚有緊張感,即可用16號(hào)針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d.  將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測(cè)定抗體效價(jià),分裝,-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀4妗?br />  公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊:  Human proliferating cell nuclear antigen antibody,PCNA 人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)
Human anti-IgE receptor antibody 人抗IgE受體抗體
Human anti-IVIgG antibody 人抗IVIgG抗體
Human Anti-myocardial antibody,AMA 人抗心肌抗體(AMA)
human Anti-Thyroid Microsome Antibody,ATMA/TMAB 人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)
human Anti-Thyroid Microsome Antibody,ATMA/TMAB 人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)
human glutamic acid decarboxylase autoantibody,GAD-Ab 人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)
Human plaet antibodies IgG/M/A,PA-IgG/M/A 人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)
Human anti-lymphocyte globulin,ALG 人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)
Human Anti-trypsin,AT 人抗*(AT)
Human anti-ribosomal P protein antibody,ARPA/Rib-P 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)
Human anti-ribosomal P protein antibody,ARPA/Rib-P 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)
Human Anti-Somatic Muscle Antibody,ASA 人抗骨骼肌抗體(ASA)
Human Thyroid Antibody,TAb 人甲狀腺抗體(TAb)
Human islet cell antibody,ICA 人胰島細(xì)胞抗體(ICA)
Human salivary duct autoantibody,SDA 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)
Human mitotic spindle apparatus antibody,MSA 人抗紡錘體抗體(MSA)
Human Anti-keratin antibody,AKA 人抗角蛋白抗體(AKA)
Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA 人抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)
human anti-neutrophil cytoplasmic antibody,cANCA 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)  
(2)  體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng),又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段,即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多,細(xì)胞存活時(shí)間越長(zhǎng),單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。


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