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核受體輔助抑制因子抗體

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更新時(shí)間：2016-01-12 21:21:43瀏覽次數(shù)：284次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

核受體輔助抑制因子抗體經(jīng)過*實(shí)踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟，在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。

詳細(xì)介紹

核受體輔助抑制因子抗體 動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止，通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法，鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得，因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi)，在小鼠腹腔內(nèi)生長(zhǎng)雜交瘤，并產(chǎn)生腹水，因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高?？梢娫摲ú僮骱?jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)，不過，腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白（包括Ig），因此在很多情況下要提純后才能使用，而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn)，故而用SPF級(jí)小鼠。 核受體輔助抑制因子抗體A、材料：a.  成年BALB/c小鼠。b.  降植烷（Pristane）或液體石蠟。c.  處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法：a.  腹腔接種降植烷或液體石蠟，每只小鼠0.3-0.5ml。b.  7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞，每只小鼠5×105/0.2ml。c.  間隔5天后，每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況，如腹部明顯膨大，以手觸摸時(shí)，皮膚有緊張感，即可用16號(hào)針頭采集腹水，一般可連續(xù)采2-3次，通常每只小鼠可采5-10ml腹水；d.  將腹水離心（2000r/min 5分鐘），除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物，收集上清，測(cè)定抗體效價(jià)，分裝，-70℃凍存?zhèn)溆?，或凍干保存?br /> 公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊：Human Thyroglobulin,TG 人甲狀腺球蛋白（TG）
Human Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a 人真核翻譯起始因子3a（eIF3a）
Human phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK 人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK）
Human phospholamban,PLN 人受磷蛋白（PLN）
Human tumour necrosis factor related weak inducer of apoptosis,TWEAK 人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子（TWEAK）
Human IPO-38 人IPO-38蛋白（IPO38）
human excision repair cross-complementation group 1,ERCC1 人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1（ERCC1）
Human Protein Carbonyl,PC 人羰基化蛋白（PC）
human phospho-inhibitory subunit of NF-κBα,pIKBα 人磷酸化核因子κB抑制蛋白α（pIKBα）
Human paxillin,Pax 人樁蛋白（Pax）
Human small breast epithelial mucin,SBEM 人小乳腺表皮粘蛋白（SBEM）
human Mus musculus similar to 60S ribosomal protein L12,LOC382344 人類似60S核糖體蛋白L21（LOC382344）
human orosomucoid 2,ORM2 人類粘蛋白2（ORM2）
human MAX dimerization protein 1,mxd1 人MAX二聚化蛋白1（mxd1）
human claudin 14,CLDN14 人水閘蛋白14（CLDN14）
human lectin-galactose binding-soluble 3,Lgals3 人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3（Lgals3）
human major vault protein,MVP 人主要穹窿蛋白（MVP）
human ubiquitin D,UBD 人泛素蛋白D（UBD）
human toll-like receptor 2,TLR2 人toll樣受體2（TLR2）
體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講，雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞（anchorage dependent cell，ADC），因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng)，又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段，即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中，以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)，細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳，然后收集培養(yǎng)上清，其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然，這種方法制備的單抗量極為有限，無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗，就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量（高密度）培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多，細(xì)胞存活時(shí)間越長(zhǎng)，單抗的濃度就越高，產(chǎn)量就越大。


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