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更新時間:2016-03-01 16:23:06瀏覽次數(shù):511次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)神經(jīng)肽 Y抗體經(jīng)過*實踐已經(jīng)發(fā)展的相當成熟,在免疫學診斷中的應用也相當廣泛。
神經(jīng)肽 Y抗體 動物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高??梢娫摲ú僮骱啽?、經(jīng)濟,不過,腹水中?;煊行∈蟮母鞣N雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。 神經(jīng)肽 Y抗體
A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數(shù)生*的雜交瘤細胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,-70℃凍存?zhèn)溆?,或凍干保存?br /> 公司產(chǎn)品詳情請參閱有關詳細論述鏈接點擊:Human desmogleins 1,DGS-E1 人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)
Human CA724 人腫瘤標志物(CA724)
Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL 人中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)
Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen,LTA 人非小細胞肺癌抗原(LTA)
Human tumor marker DR-70 for lung cancer,DR-70TM 人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)
Human fetal sulfoslycoprotein antigen,FSA 人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)
Human Bence-Jones protein,BJP 人本周蛋白(BJP)
Human Carcinoembryonic Ferritin,CEF 人癌胚鐵蛋白(CEF)
Human squamous cell carcinoma related antigen,SCCAg 人鱗狀細胞癌相關抗原(SCCAg)
Human tumor specific antigen,TSA 人腫瘤特異性抗原(TSA)
Human melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM 人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)
Human breast cancer susceptibility protein 2,BRCA-2 人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)
Human apoptosis signal regulating kinase 1,ASK-1 人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)
Human Bcl-2 associated X protein, Bax 人Bcl-2相關X蛋白(BAX)
Human Transfer factor,TF 人轉(zhuǎn)移因子(TF)
Human Colon Cancer Antigen,CCA 人結(jié)腸癌抗原(CCA)
Human H-ras 人H-ras
體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養(yǎng),又可以進行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細胞的單層細胞培養(yǎng)法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細胞數(shù)量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。
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