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可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體

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更新時(shí)間:2016-01-10 23:54:38瀏覽次數(shù):705次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體經(jīng)過(guò)*實(shí)踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟,在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。

詳細(xì)介紹

可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得,因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長(zhǎng)雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見(jiàn)該法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì),不過(guò),腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn),故而用SPF級(jí)小鼠。可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體A、材料:a.  成年BALB/c小鼠。b.  降植烷(Pristane)或液體石蠟。c.  處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法:a.  腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b.  7-10天后腹腔接種用PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c.  間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時(shí),皮膚有緊張感,即可用16號(hào)針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d.  將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測(cè)定抗體效價(jià),分裝,-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀4妗?br />公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊: 丙二醛(MDA)測(cè)試盒 100管/96樣 盒 TBA法 150
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微量丙二醛(MDA)測(cè)試盒 100管/48樣 盒 比色法 200
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*-S轉(zhuǎn)移酶(GSH-ST)測(cè)試盒 100管/48樣 盒 比色法 200
*-過(guò)氧化物酶(GSH-PX)測(cè)試盒 100管/48樣 盒 比色法 260
50管/24樣 盒 比色法 200
還原型*(GSH)測(cè)試盒 100管/48樣 盒 比色法 180
氧化型*(GSSG)測(cè)試盒 50管 盒 比色法 600
*-還原酶(GR)測(cè)試盒 50管 盒 比色法 200
過(guò)氧化氫酶(CAT)測(cè)試盒 紫外分光光度法 100管 盒 紫外比色法 100
可見(jiàn)光分光光度法 100管/48樣 盒 鉬酸銨法 100
總抗氧化能力(T-AOC)測(cè)試盒 100管/50樣 盒 比色法 120
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羥自由基測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法 150
抑制與產(chǎn)生超氧陰離子自由基(O2·)測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法 180
總巰基(-SH)測(cè)試盒 50管/24樣 盒 比色法 180
分型巰基(-SH)測(cè)試盒 100管/24樣 盒 比色法 180
過(guò)氧化氫(H2O2)測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法 50
一氧化氮(NO)測(cè)試盒(硝酸還原酶法) 100管/48樣 盒 比色法 320
(2)  體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴(lài)細(xì)胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng),又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段,即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無(wú)疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多,細(xì)胞存活時(shí)間越長(zhǎng),單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。


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