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犬腫瘤壞死因子α（TNFα）Elisa Kit

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產(chǎn)品簡介

全程ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，犬腫瘤壞死因子α（TNFα）Elisa Kit免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)（從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。）

詳細(xì)介紹

犬腫瘤壞死因子α（TNFα）Elisa Kit Canine Tumor necrosis factor α，TNFα ELISA Kit
Tumor necrosis factor α，TNFα，腫瘤壞死因子α。TNFα前體是以跨膜蛋白的形式存在于細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞外被剪切成17KDa的成熟形態(tài)（157個(gè)氨基酸）。活性的TNFα以非共價(jià)鍵二聚體、三聚體甚至五聚體的形式存在，但在SDS-PAGE顯示為單一17KDa條帶。很多細(xì)胞都能合成TNFα，包括各種免疫細(xì)胞（單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T、B細(xì)胞、粒細(xì)胞、NK細(xì)胞）和非免疫細(xì)胞（上皮細(xì)胞、纖維細(xì)胞、肌細(xì)胞、Kuppfer細(xì)胞等）。TNFα的合成受到很多因素的影響。其生理功能早認(rèn)為是有抗腫瘤活性，現(xiàn)在已明確不僅能調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長，對很多細(xì)胞的生長、分化和代謝都有影響。TNFα是免疫宿主反應(yīng)的快速反應(yīng)因子。其另一特點(diǎn)是在免疫疾病中病理性作用。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)*（biotin）標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
犬腫瘤壞死因子α（TNFα）Elisa Kit操作流程示意：
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上海撫生“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購犬腫瘤壞死因子α（TNFα）Elisa Kit優(yōu)勢如下：
1）*抗體——高效、靈敏、特異
2）規(guī)范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3）*的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4）適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5）可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
試劑和樣本的控制方法：
一、犬腫瘤壞死因子α（TNFα）Elisa Kit試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、犬腫瘤壞死因子α（TNFα）Elisa Kit樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解
操作步驟：
1、犬腫瘤壞死因子α（TNFα）Elisa Kit標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
2、加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液：將30倍（48T 的20 倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7、溫育：操作同3。
8、洗滌：操作同5。
9.在確保酶標(biāo)板底無水滴及孔內(nèi)無氣泡后，立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測量各孔的光密度（O.D. 值）。
10、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
11、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
12、測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
以下是犬腫瘤壞死因子α（TNFα）Elisa Kit的詳細(xì)介紹，點(diǎn)擊了解更多其它 ELISA Kit。