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小鼠血管生成素2（ANG II）Elisa Kit

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產(chǎn)品簡介

小鼠血管生成素2（ANG II）Elisa Kit檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

詳細(xì)介紹

試劑準(zhǔn)備：
1. 小鼠血管生成素2（ANG II）Elisa Kit使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。
小鼠血管生成素2（ANG II）Elisa KitMouse angiopoietin-II, Ang II ELISA Kit
血管生成素2（angiopoietin-2, Ang-2)是Ang家族的成員之一，是特異性血管生成刺激因子，也是惡性腫瘤早期的標(biāo)志分子。Ang-2與Ang-1 60%同源，相互間易形成異二聚體結(jié)構(gòu)，自身也常以同源二聚體及多聚體結(jié)構(gòu)存在。Ang-2的生物學(xué)功能與Ang-1*相反。Ang-1與血管內(nèi)皮細(xì)胞的Tie-2受體結(jié)合，促進(jìn)血管成熟及穩(wěn)定，Ang-2與Tie-2結(jié)合，不使Tie-2磷酸化而激活Tie-2，反而拮抗Ang-1的生物活性，破壞血管完整性，影響內(nèi)皮細(xì)胞之間及其與支持細(xì)胞之間的連接。在腫瘤發(fā)生的早期，Ang-2參與破壞瘤體周邊原有的正常血管，而促進(jìn)腫瘤新生血管的生成，在瘤體周邊形成所謂的血管共擇（co-option）區(qū)。當(dāng)腫瘤形成以后，Ang-2與血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）有協(xié)同作用，共同促進(jìn)腫瘤血管生成，并阻礙血管的完整性，使得腫瘤新生血管能在各種因子的刺激下不斷增生。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)*（biotin）標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。

產(chǎn)品名稱	小鼠血管生成素2（ANG II）Elisa Kit
英文名稱	Mouse angiopoietin-II, Ang II ELISA Kit
規(guī)格	48T/96T

公司采用小鼠血管生成素2（ANG II）Elisa Kit的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。
樣本處理及要求：
1. 小鼠血管生成素2（ANG II）Elisa Kit血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。
仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
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