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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2019-02-19 14:43:14瀏覽次數(shù):478次
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人載脂蛋白A1(apo A1)Elisa Kit檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
公司采用人載脂蛋白A1(apo A1)Elisa Kit的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 人載脂蛋白A1(apo A1)Elisa Kit |
英文名稱 | Human apo A1 ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
人載脂蛋白A1(apo A1)Elisa KitHuman apo A1 ELISA Kit
apo A1,載脂蛋白A1。 apo A1是血漿高密度脂蛋白(HDL)中的主要多肽。apo A1 基因的結(jié)構(gòu)和功能令人感興趣是因?yàn)樵贖DL水平和冠心病間顯示的負(fù)相關(guān)性。267 個(gè)氨基酸的前體初經(jīng)過細(xì)胞內(nèi)與翻譯同時(shí)進(jìn)行的蛋白水解酶的切割成為前apoA-I。前apoA-I 從細(xì)胞中分泌,在胸導(dǎo)管淋巴中以 apoA-I1 亞型被分離。apo A1 存在于血漿,經(jīng)歷翻譯后蛋白酶水解加工成熟為血漿 apoA-I。溴化氰對(duì)該蛋白的切割產(chǎn)生4個(gè)片段,以從 Bio-Gel P-30上洗脫的順序依次稱為 CNBr I、II、III和 IV。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
試劑準(zhǔn)備:
1. 人載脂蛋白A1(apo A1)Elisa Kit使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。?
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* 喹乙宗標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格: 73-49-4
* 奎寧酸標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格: 77-95-2
* 葡萄糖酸奎尼丁標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格: 7054-25-3
* 奎寧單鹽酸鹽二水合物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格: 6119-47-7
* 奎寧酮標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格: 84-31-1
* 雷貝拉唑相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:
* 鹽酸萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格: 90274-24-1
* *標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格: 82640-0
樣本處理及要求:
1. 人載脂蛋白A1(apo A1)Elisa Kit血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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