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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2019-02-19 13:32:52瀏覽次數(shù):597次
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人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)Elisa Kit檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)Elisa KitHuman ACE ELISA Kit
ACE,血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶,是一種鋅金屬肽酶,對水和鹽的代謝及維持血壓起重要作用。血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)換酶(ACE)是一種單鏈多態(tài)酸性糖蛋白,活性中心含有金屬元素鋅,分子量約14~16kd,屬二肽羧肽酶。近來人們認(rèn)為,ACE主要存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞上,同時也可以存在于其他上皮細(xì)胞上。人體內(nèi)含ACE的組織為腦脈絡(luò)叢、黑質(zhì)紋狀體通路及基底節(jié)區(qū)。ACE在腎素血管緊張素系統(tǒng)和*原-激肽系統(tǒng)中起著主要作用。ACE作用于血管緊張素Ⅰ(十肽)的C末端,脫去組氨酰*,形成具有強增壓作用的血管緊張素Ⅱ(八肽);ACE還能作用于具有降壓作用的舒緩激肽(九肽)的末端,脫去苯丙氨酰*,使之失去生理活性,從而發(fā)揮調(diào)節(jié)血管張力、維持血壓穩(wěn)定的作用。另外在平滑肌細(xì)胞增生中也有一定作用。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
產(chǎn)品名稱 | 人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)Elisa Kit |
英文名稱 | Human ACE ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑準(zhǔn)備:
1. 人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)Elisa Kit使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。?
樣本處理及要求:
1. 人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)Elisa Kit血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司采用人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)Elisa Kit的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
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