大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒說明書
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全程ELISA實驗技術指導,人M2腎丙酮酸激酶(M2-PK)Elisa Kit免費代做實驗(從標本收集、保存、預試驗、實驗、數據分析等全實驗過程提供完整的技術指導。)
人M2腎丙酮酸激酶(M2-PK)Elisa Kit Human pyruvate kinase,PK ELISA Kit
腎丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)是糖酵解途徑的一個關鍵酶,它有四種不同的同工酶,分別為L型、R型、M1型和M2型。這四種同工酶的表達具有組織特異性。L型主要見于肝臟和正常腎臟的近曲小管;紅細胞主要表達R型;M1型主要存在于骨骼肌、心臟和腦;M2 主要表達于肺、正常腎臟的遠曲小管、胚胎和未分化或增生的組織。正常情況下,上述四種PK亞型都以高活性的四聚體形式存在。但在腫瘤細胞中, M2-PK亞型主要以低活性的二聚體形式存在,成為腫瘤細胞特征性的糖代謝酶。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經*(biotin)標記。樣品和*標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TM2-PK顯色。TM2-PK在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
人M2腎丙酮酸激酶(M2-PK)Elisa Kit操作流程示意:?
上海撫生“質量是企業是生命之源”,選購人M2腎丙酮酸激酶(M2-PK)Elisa Kit優勢如下:
1)*抗體——高效、靈敏、特異
2)規范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3)*的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4)適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5)可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
試劑和樣本的控制方法:
一、人M2腎丙酮酸激酶(M2-PK)Elisa Kit試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照國家標準進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、人M2腎丙酮酸激酶(M2-PK)Elisa Kit樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解
操作步驟:
1、人M2腎丙酮酸激酶(M2-PK)Elisa Kit標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,依次進行稀釋數倍。
2、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9.在確保酶標板底無水滴及孔內無氣泡后,立即用酶標儀在 450nm 波長測量各孔的光密度 (O.D. 值)。
10、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
11、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
12、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
以下是人M2腎丙酮酸激酶(M2-PK)Elisa Kit的詳細介紹,點擊了解更多Human ELISA Kit。
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規格:96T/48T人胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒英文名稱:Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit進口/原裝
規格:96T/48T人*(PP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Pepsin,PP ELISA Kit進口/原裝
規格:96T/48T人*原A(PG-A)ELISA試劑盒英文名稱:human Pepsinogen A,PG-A ELISA Kit*
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