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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間：2019-02-15 13:44:45瀏覽次數(shù)：413次
聯(lián)系我時，請告知來自 智慧城市網大鼠髓過氧化物酶 （MPO）Elisa Kit檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
試劑準備：
1. 大鼠髓過氧化物酶 （MPO）Elisa Kit使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。
大鼠髓過氧化物酶 （MPO）Elisa KitRat MPO ELISA Kit
髓過氧化物酶(MPO)是一種血色素蛋白(分子質量 118kDa)，含一對重鏈和輕鏈 ，它存于嗜中性多核細胞的嗜天青顆粒和巨嗜細胞中，其功能為將氯化物和過氧化氫轉變?yōu)榇温人猁}。在炎癥狀態(tài)下，它被釋放入細胞外液進入循環(huán)，因此傳統(tǒng)認為是一種殺菌的酶，在人體的天然防御 、免疫功能方面起重要作用。此酶參與含低密度脂蛋白(1ow density li—poprotein，LDL)的脂類氧化。以鄰位二氨基苯胺鹽酸鹽為底物加過氧化氫可定量血中和組織中的酶活性。MPO能氧化低密度脂蛋白*(1ow density lipoprotein cholesterol，LD—LC)，從而有利于巨噬細胞攝取LDLC并轉變?yōu)榕菽毎?；氧化高密度脂蛋白(hi density lipoprotein，HDL)，使其失去正常的功能；另外，MPO激活金屬蛋白酶、使粥樣硬化斑塊表 面不穩(wěn)定趨于破裂；同時 MPO還催化消耗 內皮衍生的一 氧化氮(nitric oxide，NO)，從而減少 NO的生物利用度，損害 N0的血管擴張和抗炎功能Is]。關于 MPO的測定方法有多 種，紫外分光光度比色法、流式細胞儀和免疫組織化學染色 法 用來檢測循環(huán)中和組織中多形核細胞的 MPO活性，而 近期出現(xiàn)的酶聯(lián)免疫的定量法可測定血液中MPO的濃度。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經*（biotin）標記。樣品和*標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
產品名稱 | 大鼠髓過氧化物酶 （MPO）Elisa Kit |
英文名稱 | Rat MPO ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
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公司采用大鼠髓過氧化物酶 （MPO）Elisa Kit的全是進口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強，無效包退包換，公司提供免費代測服務，各種種屬ELISA試劑盒產品齊全，質量可靠。
樣本處理及要求：
1. 大鼠髓過氧化物酶 （MPO）Elisa Kit血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。
仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
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