VERO(非洲綠猴腎細胞)細菌破壁方法:細菌破壁是成功提取DNA的關鍵步驟之一。革蘭氏陽性菌的肽聚糖層構成堅韌的三維立體結構,而陰性菌肽聚糖層構成疏松的二維結構,因此不同種類細菌的破壁方法不同。目前破壁方法有十二烷基磺酸鈉(SDS)裂解法、*法、反復凍融法、研磨法、超聲波法等。不同細菌對溶解劑有不同的抗性,溶解細菌前需先取少量菌懸液,加一定濃度的溶解劑,看是否能溶解菌體。VERO(非洲綠猴腎細胞)若SDS和*均能溶解菌體,使用既廉價又能抑制DNase的SDS;若需用*應加入SDS促進溶菌;如果60℃溶菌過程緩慢,可將溫度提高到70~75℃;有些菌也可用脫氧膽酸鹽破裂細胞膜溶解菌體。對溶解劑有抗性的菌類,可在含*或*的培養基中培養,使其不形成細胞壁。如SDS和酶破壁效果不理想,可同時用反復凍融、超聲波或氧化鋁和玻璃粉研磨輔助破壁。
調亡誘導因子抗體
腺苷酸激酶-1
醛縮酶A抗體
間變型淋巴瘤激酶抗體
肝再生增強因子抗體
抗堿性磷酸酶抗體
α-甲基酰基*消旋酶抗體
神經元突觸前膜蛋白抗體
腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
糖尿病相關肽/胰島淀粉樣肽抗體
細胞污染解決方法:污染表現是很碎小的黑色聚堆的東西(能想象一堆碎松針堆個圓嗎),高倍鏡下似乎能動(或者只是物理運動),動作幅度不大,發展較慢,出現后對細胞生長和狀態看不出影響,但一旦吹散則發展迅速,污染明顯,細胞死亡,培養基發黃. 這是結團的細菌。開始長得很慢,一旦擴散就很快使培養基變渾濁。出現染菌只能丟掉,重新開始培養。不必試圖把菌殺死保留細胞,因為這一般無法辦到。
高倍鏡下看“團”的周圍,其實可以看打到很多細菌在不停地“打彎”運動。如果發現得早, 可以盡可能地將其稀釋除掉控制的辦法就是多開紫外,實驗前東西現用現滅,從瓶子里取培養基時多用移液管少用槍頭,勤快打掃無菌室。