本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠羥*(Hyp)水平。用純化的大鼠羥*(Hyp)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入羥*(Hyp)，再與 HRP標記的羥*(Hyp)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的羥*(Hyp)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠羥*(Hyp)濃度。
試劑盒組成
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
6ml×1瓶
12孔×8條
6ml×1瓶
6ml×1瓶
6ml×1/瓶
終止液
6ml×1瓶
0.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
1份
2 酶標試劑
標準品（80μg/L）
標準品稀釋液
3 酶標包被板
4 樣品稀釋液
5 顯色劑 A液
6 顯色劑 B液
10 說明書
11 封板膜
12 密封袋
2張
1個
標本要求大鼠羥*(Hyp)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
40μg/L
20μg/L
10μg/L
5μg/L
5號標準品
4號標準品
3號標準品
2號標準品
1號標準品
150μl的原倍標準品加入 150μl標準品稀釋液
150μl的 5號標準品加入 150μl標準品稀釋液
150μl的 4號標準品加入 150μl標準品稀釋液
150μl的 3號標準品加入 150μl標準品稀釋液
150μl的 2號標準品加入 150μl標準品稀釋液
2.5μg/L
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
