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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
00511 人組織因子(TF)ELISA試劑盒 Human Tissue factor,IF ELISA Kit 96T/48T
00512 人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒 Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 96T/48T
00513 人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒 Human D-Dimer,D2D ELISA Kit 96T/48T
00514 *E(IgE)ELISA試劑盒 human Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 96T/48T
00515 人髓系細胞觸發受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒 Human Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 ELISA Kit 96T/48T
00516 人白細胞調節素(LR)ELISA試劑盒 Human leukoregulin,LR ELISA Kit 96T/48T
00517 人血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒 Human Thrombopoietin,TPO ELISA Kit 96T/48T
00518 人糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒 Human glycosylated serum protein,GSP ELISA Kit 96T/48T
00519 人糖化白蛋白(GA)ELISA試劑盒 Human Glycated Albumin,GA ELISA Kit 96T/48T
00520 人C多肽(CP) ELISA試劑盒 Human C-Polypeptide,CP ELISA Kit 96T/48T
00521 人胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒 Human Glucagon,GC ELISA Kit 96T/48T
00522 人*(Thymosin)ELISA試劑盒 Human Thymosin ELISA Kit 96T/48T
00523 人內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒 Human visfatin ELISA Kit 96T/48T
00524 人apelin 12(AP12)ELISA試劑盒 Human apelin 12,AP12 ELISA Kit 96T/48T
00525 人多巴胺(DA)ELISA試劑盒 human dopamine,DA ELISA Kit 96T/48T
00526 人促腎上腺皮質激素(ACTH)ELISA試劑盒 human adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit 96T/48T
00527 人促腎上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒 human corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit 96T/48T
00528 人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒 Human Thyroglobulin,TG ELISA Kit 96T/48T
00529 人羰基化蛋白(PC)ELISA試劑盒 Human Protein Carbonyl,PC ELISA Kit 96T/48T
00530 人螺旋肽(THP)ELISA試劑盒 Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit 96T/48T
00531 人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒 Human β Lactoglobulin,β-Lg ELISA Kit 96T/48T
00532 人β連環蛋白/聯蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒 Human β catenin,β-Cat ELISA Kit 96T/48T
00533 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒 Human β amyloid precursor protein,βAPP ELISA Kit 96T/48T
00534 人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA試劑盒 Human beta2 glycoprotein,β2-GP ELISA Kit 96T/48T
00535 人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒 Human α Lactalbumin,α-La ELISA Kit 96T/48T
00536 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 Human Lactoferrin,LTF/LF ELISA Kit 96T/48T
00537 人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit 96T/48T
00538 人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 Human High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 96T/48T
00539 人結蛋白(Des)ELISA試劑盒 Human desmin,Des ELISA Kit 96T/48T
00540 人S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 Human Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 96T/48T
00541 人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 Human Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit 96T/48T
00542 人β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 human Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T
00543 人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA試劑盒 Human protocadherin 1,PCDH1 ELISA Kit 96T/48T
00544 人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒 Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK ELISA Kit 96T/48T
00545 人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒 Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA Kit 96T/48T
00546 人B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒 Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1 ELISA Kit 96T/48T
00547 人結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒 Human connective tissue-activating peptide Ⅲ,CTAPⅢ ELISA Kit 96T/48T
00548 *A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒 Human Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin A,FcαRⅠ ELISA Kit 96T/48T
00549 *E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒 Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin E,FcεRⅡ ELISA Kit 96T/48T
00550 *G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒 Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA Kit 96T/48T
00551 *G Fc段受體兔心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒 Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA Kit 96T/48T
00552 *G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒 Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit 96T/48T
00553 人粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒 Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5 兔心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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