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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔*(LZM)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔*(LZM)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔*(LZM)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
00556 人干擾素調節因子(IRF)ELISA試劑盒 Human interferon Regulatory Factor,IRF ELISA Kit 96T/48T
00557 人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒 Human lymphotoxinβ,LTB ELISA Kit 96T/48T
00558 人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒 Human lymphotoxinα,LTA ELISA Kit 96T/48T
00559 人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒 Human CC-chemokine receptor 1,CCR1 ELISA Kit 96T/48T
00560 人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒 Human CX3C-chemokine receptor 1,CX3CR1 ELISA Kit 96T/48T
00561 人肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 Human pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit 96T/48T
00562 人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒 Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1,MAdCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
00563 人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒 Human Soluble Cluster of differentiation 38,sCD38 ELISA Kit 96T/48T
00564 人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒 Human Soluble Cluster of differentiation 21,sCD21 ELISA Kit 96T/48T
00565 人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 Human Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit 96T/48T
00566 人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒 Human Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit 96T/48T
00567 人單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 Human monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit 96T/48T
00568 人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒 Human Neural-Cadherin, N-Cad ELISA Kit 96T/48T
00569 人肝素結合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒 Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF ELISA Kit 96T/48T
00570 人紅細胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒 Human erythropoiesis stimulating factor,ESF ELISA Kit 96T/48T
00571 人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(TRANCE)ELISA試劑盒 Human TNF related activation induced cytokine,TRANCE ELISA Kit 96T/48T
00572 人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒 Human Epithelial Cell Adhesion Molecule,Ep-CAM ELISA Kit 96T/48T
00573 人巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA Kit 96T/48T
00574 人可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit 96T/48T
00575 人胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒 Human thymic stromal lymphopoietin,TSLP ELISA Kit 96T/48T
00576 人可溶性CD28(sCD28)ELISA試劑盒 human soluble cluster of differentiation 28,sCD28 ELISA Kit 96T/48T
00577 人胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒 Human thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA Kit 96T/48T
00578 人神經細胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒 Human Neural cell adhesion molecule ligand 1,NCAM-L1 ELISA Kit 96T/48T
00579 人可溶性凋亡相關因子配體(sFASL)ELISA試劑盒 Human soluble Factor-related Apoptosis ligand,sFASL/Apo-1 ELISA Kit 96T/48T
00580 人細胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒 Human inhibitor of apoptosis,IAP ELISA Kit 96T/48T
00581 人γ干擾素誘導單核細胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒 Human monocyte interferon gamma inducing factor,MIGF ELISA Kit 96T/48T
00582 人干擾素誘導T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒 Human Interferon inducible T-cell Chemoattractant,I-TAC ELISA Kit 96T/48T
00583 人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒 Human cluster Of differentiation,CDl4 ELISA Kit 96T/48T
00584 人白細胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒 Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 ELISA Kit 96T/48T
00585 人CD4分子(CD4)ELISA試劑盒 Human cluster Of differentiation,CD4 ELISA Kit 96T/48T
00586 人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒 Human CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISA Kit 96T/48T
00587 人CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒 Human CXC-chemokine receptor 3,CXCR3 ELISA Kit 96T/48T
00588 人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 Human interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA Kit 96T/48T
00589 人基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒 Human Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA Kit 96T/48T
00590 人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 Human soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA Kit 96T/48T
00591 人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒 Human Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit 96T/48T
00592 人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 Human Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit 96T/48T
00593 人干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 Human interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit 96T/48T
00594 人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒 Human macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit 96T/48T
00595 人結締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒 Human connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit 96T/48T
00596 人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒 Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor,BAFF-R ELISA Kit 兔*(LZM)ELISA試劑盒96T/48T
00597 人血管內皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒 Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit 96T/48T
00598 人血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒 Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5 兔*(LZM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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