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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
01385 人蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒 Human Proteoglycan,PG ELISA Kit 96T/48T
01386 人吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒 Human Pyridinoline,PYD ELISA Kit 96T/48T
01387 人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 Human Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit 96T/48T
01388 人鳥苷酸交換因子(GEF)ELISA試劑盒 Human Guanine Exchange Factor,GEF ELISA Kit 96T/48T
01389 人*受體(VD R)ELISA試劑盒 Human Vitamin D Receptor,VD R ELISA Kit 96T/48T
01390 人毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA試劑盒 Human toxic shock syndrome toxin,TSST-1 ELISA Kit 96T/48T
01391 人金葡菌腸毒素(SE)ELISA試劑盒 Human staphylococcus aureus enterotoxins,SE ELISA Kit 96T/48T
01392 人β細胞素(BTC) ELISA試劑盒 Human beta cellulin,BTC ELISA Kit 96T/48T
01393 人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒 Human placental ribonuclease inhibitor,HPRI ELISA Kit 96T/48T
01394 人胎盤催乳素(HPL)ELISA試劑盒 Human placenta lactogen,HPL ELISA Kit 96T/48T
01395 人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒 Human anti-cytomegalovirus IgM antibody,anti-CMV IgM ELISA Kit 96T/48T
01396 人抗巨細胞病毒抗體IgM(anti-CMV IgM)ELISA試劑盒 Human anti-cytomegalovirus IgM antibody,anti-CMV IgM ELISA Kit 96T/48T
01397 人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)ELISA試劑盒 Human anti-toxoplasma IgG antibody,anti-tox IgG ELISA Kit 96T/48T
01398 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒 Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone,N-TSH ELISA Kit 96T/48T
01399 人妊娠特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA試劑盒 Human Pregnancy Specificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-G ELISA Kit 96T/48T
01400 人胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒 Human placetal lactogen,PL ELISA Kit 96T/48T
01401 人雄激素結合蛋白(ABP)ELISA試劑盒 Human Androgen Binding Protein,ABP ELISA Kit 96T/48T
01402 人抗滋養膜細胞抗體(ATA)ELISA試劑盒 Human anti-trophoblast antibody,ATA ELISA Kit 96T/48T
01403 人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒 Human anti-zona pellucida antibody,aZP ELISA Kit 96T/48T
01404 人抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒 Human Anti-Ovary Antibody,AOAb ELISA Kit 96T/48T
01405 人抗巨細胞病毒抗體IgG(anti-CMV IgG)ELISA試劑盒 Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG ELISA Kit 96T/48T
01406 人妊娠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit 96T/48T
01407 人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒 Human soluble human leucocyte antigen G1,sHLA-G ELISA Kit 96T/48T
01408 人補體因子D(CFD)ELISA試劑盒 Human complement factor D,CFD ELISA Kit 96T/48T
01409 人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒 Human Plasma fibronectin,pFN ELISA Kit 96T/48T
01410 人細胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA試劑盒 Human cellular fibronectin,cFn ELISA Kit 96T/48T
01411 人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒 Human Total protein S,TPS ELISA Kit 96T/48T
01412 人血清剝奪反應相關蛋白(SDPR)ELISA試劑盒 human serum deprivation response,SDPR ELISA Kit 96T/48T
01413 人中性粒細胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒 Human neutrophil peptide 1-3,HNP1-3 ELISA Kit 96T/48T
01414 人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 96T/48T
01415 人血漿抗凝蛋白S(PS) ELISA試劑盒 Human plasma anticoagulant protein S,PS ELISA Kit 96T/48T
01416 人血漿抗凝蛋白C(PC) ELISA試劑盒 Human plasma anticoagulant protein C,PC ELISA Kit 96T/48T
01417 *G Fc片段(Fcγ)ELISA試劑盒 Human Fc region of immunoglobulin G,Fcγ ELISA Kit 96T/48T
01418 人嗜環蛋白/親環素B(CyPB)ELISA試劑盒 Human cyclophilin B,CyPB ELISA Kit 96T/48T
01419 人*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 Human coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit 96T/48T
01420 人*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 Human coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit 96T/48T
01421 人補體1q(C1q)ELISA試劑盒 Human Complement 1q,C1q ELISA Kit 96T/48T
01422 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒 Human plaet membrane glycoprotein Ⅳ,GP-Ⅳ ELISA Kit 96T/48T
01423 人*α1(Thymosin α1)ELISA試劑盒 Human Thymosin α1 ELISA Kit 96T/48T
01424 人補體調節蛋白(CCP)ELISA試劑盒 Human complement control protein,CCP ELISA Kit 96T/48T
01425 人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒 Human plaet basic protein,PBP ELISA Kit 96T/48T
01426 人類白細胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒 Human leukocyte antigen C,HLA-C ELISA Kit 96T/48T
01427 兔鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA試劑盒 Human Mannma binding lectin receptor,MBLR ELISA Kit 96T/48T
01428 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒 Human plasmin/fibrinolysin,PL/Fbn ELISA Kit 96T/48T
01429 人B細胞受體(BCR)ELISA試劑盒 Human B cell receptor,BCR ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5 兔鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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