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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔子腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔子腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
01480 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit 96T/48T
01481 人末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒 Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 96T/48T
01482 人結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 Human Haptoglobin,Hpt/HP ELISA Kit 96T/48T
01483 人血清總補體(CH50)ELISA試劑盒 Human 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit 96T/48T
01484 人過敏毒素/補體片斷4(C4a)ELISA試劑盒 Human Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit 96T/48T
01485 人補體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒 Human Complement fragment 5a,C5a ELISA Kit 96T/48T
01486 人補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 96T/48T
01487 人*Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)ELISA試劑盒 Human coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA Kit 96T/48T
01488 人*Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒 Human coagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA Kit 96T/48T
01489 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 Human von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit 96T/48T
01490 人纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒 Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit 96T/48T
01491 人*抗*復合物(TAT)ELISA試劑盒 Human thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit 96T/48T
01492 人抗*受體(ATR)ELISA試劑盒 Human anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit 96T/48T
01493 人*受體(TR)ELISA試劑盒 Human thrombin receptor,TR ELISA Kit 96T/48T
01494 人第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒 Human Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA Kit 96T/48T
01495 人血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 Human Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 96T/48T
01496 人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒 Human major histocompatibility complex Ⅰ,MHCⅠ/HLAⅠ ELISA Kit 96T/48T
01497 人抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 Human Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
01498 人血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒 Human thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit 96T/48T
01499 人淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒 Human lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 96T/48T
01500 人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒 Human major histocompatibility complex Ⅲ,MHCⅢ/HLA-Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
01501 人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒 Human major histocompatibility complex Ⅱ,MHCⅡ/HLA-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
01502 人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 Human β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit 96T/48T
01503 人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 Human Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 96T/48T
01504 人淋巴細胞功能相關抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒 Human lymphocyte function associated antigen 2,LFA-2 ELISA Kit 96T/48T
01505 人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 Human Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit 96T/48T
01506 人Salusin-α ELISA試劑盒 Human Salusin α ELISA Kit 96T/48T
01507 人胰島素受體底物2(IRS-2)ELISA試劑盒 human Insulin receptor substrate 2,IRS-2 ELISA Kit 96T/48T
01508 人轉甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒 Human transthyretin,TTR ELISA Kit 96T/48T
01509 人晚期氧化蛋白產物(AOPP)ELISA試劑盒 Human advanced oxidation protein products,AOPP ELISA Kit 96T/48T
01510 人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒 Human islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit 96T/48T
01511 人甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒 Human Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA Kit 96T/48T
01512 人晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISA試劑盒 Human advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 96T/48T
01513 人晚期糖基化終末產物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒 Human Receptor for advanced glycation end products, RAGE/AGER ELISA Kit 96T/48T
01514 人胰多肽(PP)ELISA試劑盒 Human Pancreatic Polypeptide,PP ELISA Kit 96T/48T
01515 人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒 Human insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit 96T/48T
01516 人*脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒 Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit 96T/48T
01517 人*(TP-5)ELISA試劑盒 Human Thymopentin,TP-5 ELISA Kit 96T/48T
01518 人未磷酸化類胰島素生長因子結合蛋白-1ELISA試劑盒 Human Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 ELISA Kit 96T/48T
01519 人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)ELISA試劑盒 Human parathyroid hormone-like protein,PLP ELISA Kit 96T/48T
01520 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA Kit 96T/48T
01521 人胰島素原(PI)ELISA試劑盒 Human Proinsulin,PI ELISA Kit 96T/48T
01522 人胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 Human Insulin Receptor β,ISR-β ELISA Kit 96T/48T
01523 人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒 Human Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 96T/48T
01524 人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒兔子腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒 Human ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit 96T/48T
01525 人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA試劑盒 human thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5 兔子腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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