魚嗜酸性粒細(xì)胞過(guò)氧化物酶(EPX)ELISA試劑盒說(shuō)明書
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兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
02090 小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒 Mouse Thyroglobulin,TG ELISA Kit 96T/48T
02091 小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 Mouse Inhibin,INH-A ELISA Kit 96T/48T
02092 小鼠絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒 Mouse Chorionic Gonadotrophin β,β-CG ELISA Kit 96T/48T
02093 小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒 Mouse sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit 96T/48T
02094 小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒 Mouse Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA Kit 96T/48T
02095 小鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒 Mouse Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit 96T/48T
02096 小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 Mouse High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 96T/48T
02097 小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒 Mouse Endothelial lipase,EL ELISA Kit 96T/48T
02098 小鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 Mouse carbonic anhydrase,CA ELISA Kit 96T/48T
02099 小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒 Mouse calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit 96T/48T
02100 小鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒 Mouse Motilin,MTL ELISA Kit 96T/48T
02101 小鼠*(SS)ELISA試劑盒 Mouse Somatostatin,SS ELISA Kit 96T/48T
02102 小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 Mouse Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 96T/48T
02103 小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 Mouse plaet activating factor,PAF ELISA Kit 96T/48T
02104 小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α)ELISA試劑盒 Mouse skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit 96T/48T
02105 小鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒 Mouse Myosin,MYS ELISA Kit 96T/48T
02106 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒 Mouse major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
02107 小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒 Mouse GATA binding protein 4,GATA4 ELISA Kit 96T/48T
02108 小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 Mouse interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit 96T/48T
02109 小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit 96T/48T
02110 小鼠抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 Mouse Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
02111 小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒 Mouse neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit 96T/48T
02112 小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 Mouse Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T
02113 小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 Mouse Gelsolin ELISA Kit 96T/48T
02114 小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit 96T/48T
02115 小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒 Mouse thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit 96T/48T
02116 小鼠*釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒 Mouse gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit 96T/48T
02117 小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 Mouse inhibin B,INH-B ELISA Kit 96T/48T
02118 小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒 Mouse thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA Kit 96T/48T
02119 小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒 Mouse corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit 96T/48T
02120 小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 Mouse Insulin Receptor β,ISR-β ELISA Kit 96T/48T
02121 小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒 Mouse Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 96T/48T
02122 小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒 Mouse lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 96T/48T
02123 小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒 Mouse soluble plaet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit 96T/48T
02124 小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit 96T/48T
02125 小鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 Mouse Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 96T/48T
02126 小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒 Mouse ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit 96T/48T
02127 小鼠膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA試劑盒 Mouse Cholecystokinin,CCK ELISA Kit 96T/48T
02128 小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒 Mouse brain-gut peptides,BGP/Gehrelin ELISA Kit 96T/48T
02129 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 Mouse 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit 96T/48T
02130 小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 Mouse apoprotein,apo-A1 ELISA Kit 96T/48T
02131 小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 Mouse apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 96T/48T
02132 小鼠25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 Kit 96T/48T
02133 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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