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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
02184 大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒 Rat bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit 96T/48T
02185 大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒 Rat Clusterin,CLU ELISA Kit 96T/48T
02186 大鼠轉化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒 Rat transforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA Kit 96T/48T
02187 大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 32,IL-32 ELISA Kit 96T/48T
02188 大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA Kit 96T/48T
02189 大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 21,IL-21 ELISA Kit 96T/48T
02190 大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒 Rat D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit 96T/48T
02191 大鼠胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒 Rat thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA Kit 96T/48T
02192 大鼠*(CH)ELISA試劑盒 Rat cholesterol,CH ELISA Kit 96T/48T
02193 大鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒 Rat Triglyceride,TG ELISA Kit 96T/48T
02194 大鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒 Rat low density lipoprotein,LDL ELISA Kit 96T/48T
02195 大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒 Rat High density lipoprotein,HDL ELISA Kit 96T/48T
02196 大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒 Rat progesterone receptor,PGR ELISA Kit 96T/48T
02197 大鼠血管緊張素Ⅱ轉化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒 Rat Angiotensin Ⅱ converting enzyme,ACEⅡ ELISA Kit 96T/48T
02198 大鼠血管緊張素Ⅰ轉化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒 Rat Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ ELISA Kit 96T/48T
02199 大鼠*釋放激素受體(GnRHR)ELISA試劑盒 Rat Gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRHR ELISA Kit 96T/48T
02200 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit 96T/48T
02201 大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein,HSP47 ELISA Kit 96T/48T
02202 大鼠內源性糖皮質激素(GC)ELISA試劑盒 Rat glucocorticoid,GC ELISA Kit 96T/48T
02203 大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒 Rat Citrate synthase,CS ELISA Kit 96T/48T
02204 大鼠L-鼠乳酸脫氫酶(L-LDH) ELISA試劑盒 Rat L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA Kit 96T/48T
02205 大鼠脂酰*合成酶(ACS)ELISA試劑盒 Rat Fatty acyl-CoA synthetase,ACS ELISA Kit 96T/48T
02206 大鼠肉毒堿脂酰轉移酶(CACT)ELISA試劑盒 Rat carnitine-acylcarnitine translocase,CACT ELISA Kit 96T/48T
02207 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒 Rat Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISA Kit 96T/48T
02208 大鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒 Rat Metallothionein,MT ELISA Kit 96T/48T
02209 大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒 Rat cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISA Kit 96T/48T
02210 大鼠乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒 Rat Acetylcholinesterase,AChE ELISA Kit 96T/48T
02211 大鼠糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒 Rat carbohydrate-deficient transferrin,CDT ELISA Kit 96T/48T
02212 大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒 Rat Total bile acide,TBA ELISA Kit 96T/48T
02213 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒 Rat β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISA Kit 96T/48T
02214 大鼠*結合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 Rat Retinol-binding protein,RBP ELISA Kit 96T/48T
02215 大鼠*釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA試劑盒 Rat anti-gonadotropin-releasing hormone receptor antibody,GNRHR-Ab ELISA Kit 96T/48T
02216 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒 Rat von Willebrand Factor cleaving protease,ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit 96T/48T
02217 大鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Rat major basic protein,MBP ELISA Kit 96T/48T
02218 大鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 96T/48T
02219 大鼠鈣調磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒 Rat calcineurin,CaN ELISA Kit 96T/48T
02220 大鼠抑制素結合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒 Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISA Kit 96T/48T
02221 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 Rat anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA Kit 96T/48T
02222 大鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒 Rat apoptosis inducing factor,AIF ELISA Kit 96T/48T
02223 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒 Rat anti-double stranded DNA,dsDNA ELISA Kit 96T/48T
02224 大鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 Rat alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit 96T/48T
02225 大鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒 Rat Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA Kit 96T/48T
02226 大鼠脂多糖結合蛋白兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒(LBP)ELISA試劑盒 Rat lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit 96T/48T
02227 大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒 Rat alcohol dehydrogenase,ADH ELISA Kit 96T/48T
02228 大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒 Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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