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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
02229 大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒 Rat soluble cluster of differentiation 14,sCD14 ELISA Kit 96T/48T
02230 大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒 Rat Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone,MIS/AMH ELISA Kit 96T/48T
02231 大鼠雄激素(androgen)ELISA試劑盒 Rat androgen ELISA Kit 96T/48T
02232 大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒 Rat Toll-like receptor 4,TLR4 ELISA Kit 96T/48T
02233 大鼠多巴胺轉運蛋白(DAT)ELISA試劑盒 Rat dopamine transporter,DAT ELISA Kit 96T/48T
02234 大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒 Rat dopamine D2 receptor,D2R ELISA Kit 96T/48T
02235 大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 Rat amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit 96T/48T
02236 大鼠CD44分子(CD44)ELISA試劑盒 Rat cluster Of differentiation,CD44 ELISA Kit 96T/48T
02237 大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒 Rat 8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG ELISA Kit 96T/48T
02238 大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit 96T/48T
02239 大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒 Rat insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit 96T/48T
02240 大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒 Rat Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit 96T/48T
02241 大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 6,sTLR-6 ELISA Kit 96T/48T
02242 大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit 96T/48T
02243 大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit 96T/48T
02244 大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒 Rat leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 96T/48T
02245 大鼠*(UK)ELISA試劑盒 Rat urokinase,UK ELISA Kit 96T/48T
02246 大鼠*Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit 96T/48T
02247 大鼠*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit 96T/48T
02248 大鼠*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit 96T/48T
02249 大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 Rat Apolipoprotein H,Apo-H ELISA Kit 96T/48T
02250 大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 Rat Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit 96T/48T
02251 大鼠腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒 Rat adrenomedullin,ADM ELISA Kit 96T/48T
02252 大鼠β內啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 Rat Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit 96T/48T
02253 大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA試劑盒 Rat calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ,CAMK 2 ELISA Kit 96T/48T
02254 大鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 Rat hepatic lipase,HL ELISA Kit 96T/48T
02255 大鼠煙堿型乙酰*受體(N-AChR)ELISA試劑盒 Rat nicotinic acetylcholine receptor,N-AChR ELISA Kit 96T/48T
02256 大鼠毒蕈堿型乙酰*受體(M-AChR)ELISA試劑盒 Rat muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA Kit 96T/48T
02257 大鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒 Rat activated protein C,APC ELISA Kit 96T/48T
02258 大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA試劑盒 Rat galanin,GAL ELISA Kit 96T/48T
02259 大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒 Rat α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit 96T/48T
02260 大鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒 Rat osteoclast differentiation factor,ODF ELISA Kit 96T/48T
02261 大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒 Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit 96T/48T
02262 大鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒 Rat Leptospira IgG,Lep IgG ELISA Kit 96T/48T
02263 大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒 Rat Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit 96T/48T
02264 大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA試劑盒 Rat Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA Kit 96T/48T
02265 大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒 Rat cytochrome P450,CYP450 ELISA Kit 96T/48T
02266 大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 Rat growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit 96T/48T
02267 大鼠內臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒 Rat Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit 96T/48T
02268 大鼠溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA試劑盒 Rat Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA Kit 96T/48T
02269 大鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 Rat transforming growth factorsβ2,TGFβ2 ELISA Kit 96T/48T
02270 大鼠細胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 Rat cytochrome P450 2E1,CYP2E1 ELISA Kit 96T/48T
02271 大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒 Rat α1-microglobulin,α1-MG ELISA Kit 96T/48T
02272 大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 Rat monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit 96T/48T
02273 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒 Rat peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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