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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
02459 大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒 Rat deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit 96T/48T
02460 大鼠吡啶交聯物(PY)ELISA試劑盒 Rat pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA Kit 96T/48T
02461 大鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 Rat Osteopontin,OPN ELISA Kit 96T/48T
02462 大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒 Rat Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit 96T/48T
02463 大鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒 Rat transferrin receptor,TFR ELISA Kit 96T/48T
02464 大鼠半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 Rat Cystatin C,Cys-C ELISA Kit 96T/48T
02465 大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒 Rat Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA Kit 96T/48T
02466 大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 Rat Pyruvate Kinase,M2-PK ELISA Kit 96T/48T
02467 大鼠乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 Rat acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit 96T/48T
02468 大鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒 Rat Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit 96T/48T
02469 大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 Rat 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISA Kit 96T/48T
02470 大鼠P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒 Rat substance P receptor,SP-R ELISA Kit 96T/48T
02471 大鼠P物質(SP)ELISA試劑盒 Rat Substance P,SP ELISA Kit 96T/48T
02472 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒 Rat alpha-L-fucosidase,AFU ELISA Kit 96T/48T
02473 大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒 Rat Thyroid-Peroxidase,TPO ELISA Kit 96T/48T
02474 大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒 Rat Proinsulin,PI ELISA Kit 96T/48T
02475 大鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒 Rat anti-IgE receptor antibody ELISA Kit 96T/48T
02476 大鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒 Rat anti-IVIgG antibody ELISA Kit 96T/48T
02477 大鼠P53(P53)ELISA試劑盒 Rat p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit 96T/48T
02478 大鼠環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒 Rat Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit 96T/48T
02479 大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒 Rat nitric oxide synthase,NOS ELISA Kit 96T/48T
02480 大鼠誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 Rat inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA Kit 96T/48T
02481 大鼠內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 Rat Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 96T/48T
02482 大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 Rat lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
02483 大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein 90,hSP-90 ELISA Kit 96T/48T
02484 大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein 70,hSP-70 ELISA Kit 96T/48T
02485 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein 40,hSP-40 ELISA Kit 96T/48T
02486 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein 20,hSP-20 ELISA Kit 96T/48T
02487 大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 Rat amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit 96T/48T
02488 大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 Rat Cyclin-D3 ELISA Kit 96T/48T
02489 大鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 Rat Cyclin-D2 ELISA Kit 96T/48T
02490 大鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 Rat Cyclin-D1 ELISA Kit 96T/48T
02491 大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Rat myelin basic protein,MBP ELISA Kit 96T/48T
02492 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 Rat Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit 96T/48T
02493 大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 Rat Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA Kit 96T/48T
02494 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 Rat Free Prostate Specific Antigen,fPSA ELISA Kit 96T/48T
02495 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 Rat prostate specific antigen,PSA ELISA Kit 96T/48T
02496 大鼠卵巢癌標志物CA125ELISA試劑盒 Rat ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit 96T/48T
02497 大鼠乳腺癌標志物-CA153ELISA試劑盒 Rat mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit 96T/48T
02498 大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒 Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit 96T/48T
02499 大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒 Rat heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit 96T/48T
02500 大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒 Rat Phospholipidase A2,PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
02501 大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 Rat Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit 96T/48T
02502 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 5,AQP-5 ELISA Kit 96T/48T
02503 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 4,AQP-4 ELISA Kit 96T/48T
02504 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 3,AQP-3 ELISA Kit 96T/48T
02505 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit 96T/48T
02506 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit 96T/48T
02507 大鼠水通道蛋白2(AQP-2) ELISA試劑盒 Rat Aquaporin 2,AQP-2 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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