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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
02509 大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 Rat Inhibin,INH-A ELISA Kit 96T/48T
02510 大鼠絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒 Rat Chorionic Gonadotrophin β,β-CG ELISA Kit 96T/48T
02511 大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒 Rat sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit 96T/48T
02512 大鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒 Rat Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA Kit 96T/48T
02513 大鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒 Rat Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit 96T/48T
02514 大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 Rat High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 96T/48T
02515 大鼠妊娠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 Rat pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit 96T/48T
02516 大鼠內皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒 Rat Endothelial lipase,EL ELISA Kit 96T/48T
02517 大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 Rat carbonic anhydrase,CA ELISA Kit 96T/48T
02518 大鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒 Rat calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit 96T/48T
02519 大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒 Rat Motilin,MTL ELISA Kit 96T/48T
02520 大鼠β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 Rat Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T
02521 大鼠*(SS)ELISA試劑盒 Rat Somatostatin,SS ELISA Kit 96T/48T
02522 大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 Rat Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 96T/48T
02523 大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒 Rat skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit 96T/48T
02524 大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒 Rat Myosin,MYS ELISA Kit 96T/48T
02525 大鼠結蛋白(Des)ELISA試劑盒 Rat Desmin,Des ELISA Kit 96T/48T
02526 大鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試劑盒 Rat major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
02527 大鼠GATA結合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒 Rat GATA binding protein 4,GATA4 ELISA Kit 96T/48T
02528 大鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 Rat interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit 96T/48T
02529 大鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 Rat Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit 96T/48T
02530 大鼠抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 Rat Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
02531 大鼠神經肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒 Rat neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit 96T/48T
02532 大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 Rat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T
02533 大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 Rat Gelsolin ELISA Kit 96T/48T
02534 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit 96T/48T
02535 大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒 Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit 96T/48T
02536 大鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 Rat inhibin B,INH-B ELISA Kit 96T/48T
02537 大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 Rat Insulin Receptor β,ISR-β ELISA Kit 96T/48T
02538 大鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒 Rat Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 96T/48T
02539 大鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒 Rat lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 96T/48T
02540 大鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒 Rat soluble plaet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit 96T/48T
02541 大鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA試劑盒 Rat major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
02542 大鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒 Rat major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
02543 大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit 96T/48T
02544 大鼠透明質酸(HA)ELISA試劑盒 Rat Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 96T/48T
02545 大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒 Rat ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit 96T/48T
02546 大鼠膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA試劑盒 Rat Cholecystokinin,CCK ELISA Kit 96T/48T
02547 大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒 Rat brain-gut peptides,BGP/Gehrelin ELISA Kit 96T/48T
02548 大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 Rat 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit 96T/48T
02549 大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 Rat apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit 96T/48T
02550 大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 Rat apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 96T/48T
02551 大鼠25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 Rat 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 96T/48T
02552 大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 Rat N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 Kit 96T/48T
02553 大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒 Rat Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
02554 大鼠*(VC)ELISA試劑盒 Rat Vitamin C,VC ELISA Kit 96T/48T
02555 大鼠*6(VB6)ELISA試劑盒 Rat Vitamin B6,VB6 ELISA Kit 96T/48T
02556 大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒 Rat Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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